[发明专利]采用碳纳米材料调控草坪堆肥基质放线菌鉴定分析方法

摘要

本发明公开了一种碳纳米材料调控草坪堆肥基质放线菌鉴定分析方法，以生活垃圾堆肥和土壤混合物为草坪基质材料，以向其中混合四种不同碳纳米材料作为处理组，通过草坪植物培养，研究添加不同碳纳米材料一段时间后基质中可培养放线菌类群的变化，并通过分子测序技术分析基质中可培养放线菌的分类地位。通过将碳纳米材料添加进草坪建植体系后放线菌类群的变化的认识，为碳纳米材料在垃圾堆肥草坪基质中放线菌调控应用提供技术支撑。

主权项

一种采用碳纳米材料调控草坪堆肥基质放线菌鉴定分析的方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）实验材料实验用土壤取0‑20 cm表层土壤；供试纳米炭黑粒径为20~70 nm，比表面积为 1200 m²/g，pH 值为7.0，实验前利用KMnO₄对其改性处理；石墨烯微片尺寸0.5‑20 um，厚度5‑25 nm，比表面积40‑60 m²/g，密度约2.25 g/cm³，电导率 8000‑10000 S/m，含碳量>99.5%；氧化石墨烯平均厚度3.4‑7 nm，片层直径10‑50 μm，比表面积100‑300 m²/g，纯度>90%；碳纳米管直径20‑40 nm，长度10‑30 um，‑COOH含量1.43%，纯度>90wt%，灰粉<8wt%，比表面积>110 m²/g，导电：>102 s/cm；（2）实验方法：取土后立即测量土壤含水量，计算得到土壤干重与湿重的比例，按照比例算得干重1500 g所对应的湿土重量，称得相应重量的湿土与30 g垃圾堆肥混合，搅拌均匀，装入内径15 cm高20 cm的塑料花盆中，共装15盆；实验共设5个处理：石墨烯（G）、氧化石墨烯(GO)、碳纳米管(CNT)、改性纳米炭黑(CB)按干土重1%的比例分别加入，添加碳纳米材料后充分混匀，以不添加碳纳米材料的处理为对照（CK），每盆播种高羊茅种子5g，培养期间温度为 19~27 ℃，相对湿度为 60~72%，每天给土壤补充水分，使土壤湿度保持在土壤持水量的70%，培养130d后，将盆中0‑5cm深度土壤取出混匀，过60目筛，冰箱‑20℃保存，供微生物分离与计数分析。