[发明专利]一种化学-酶法制备熊去氧胆酸的方法有效
申请号: | 201610439896.2 | 申请日: | 2016-06-20 |
公开(公告)号: | CN106086149B | 公开(公告)日: | 2020-01-21 |
发明(设计)人: | 张跃 | 申请(专利权)人: | 苏州汉酶生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P33/06 | 分类号: | C12P33/06;C07J9/00 |
代理公司: | 32103 苏州创元专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 孙仿卫 |
地址: | 215600 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种化学‑酶法制备熊去氧胆酸的方法,以鹅去氧胆酸为初始底物,依次经过化学法和生物酶法制备熊去氧胆酸,期间采用了7‑KLCA还原酶作为生物催化剂,不会出现现有技术中采用化学法制得7‑酮石胆酸过程中残留的氧化剂导致后期酶失活的情况发生,且采用本发明的制备方法所制得的产物的ee值高,综合成本低。 | ||
搜索关键词: | 一种 化学 法制 备熊去氧 胆酸 方法 | ||
【主权项】:
1.一种化学-酶法制备熊去氧胆酸的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n1)以鹅去氧胆酸为底物,在酒石酸及溶剂条件下,室温加入氧化剂,氧化反应生成7-酮石胆酸,其中,所述的溶剂为甲醇,所述的氧化剂为次氯酸钠溶液,起始反应体系中,所述鹅去氧胆酸的底物浓度为0.1~0.2g/mL;所述酒石酸与鹅去氧胆酸的投料质量比为1:2~1:3,所述氧化剂与鹅去氧胆酸的投料质量比为4:1~6:1;/n2)以步骤1)制得的7-酮石胆酸为底物,在生物催化剂、辅因子和辅酶再生系统的存在下,发生还原反应生成目标产物熊去氧胆酸,其中,所述的生物催化剂为7-KLCA还原酶,所述的辅酶再生系统为一水葡萄糖和葡萄糖脱氢酶,所述反应在温度为25~40℃、pH为6~7的水相缓冲溶液中,在助溶剂条件下进行,其中,所述的一水葡萄糖:7-KLCA还原酶:葡萄糖脱氢酶:7-酮石胆酸的投料质量比为:0.8~1.2:0.005~0.02:0.005~0.02:1。/n
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