[发明专利]一种从烟草中同时提取茄尼醇、西松烷二萜、维生素E、植物甾醇的方法

摘要

本发明公开了一种从烟草中同时提取茄尼醇、西松烷二萜、维生素E、植物甾醇的方法，步骤如下：1.提取；2.皂化：获得皂化后的茄尼醇等脂溶性活性成分浸膏；3.葡聚糖凝胶柱分离：分别获得茄尼醇、维生素E和植物甾醇(混合)、西松烷二萜粗提物；4.硅胶柱层析：通过硅胶柱层析后分别获得高纯茄尼醇、维生素E、植物甾醇；获得的西松烷二萜通过硅胶柱层析分别获得α‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇和β‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇。本发明不仅实现了烟草脂溶性活性成分的综合提取，提取脂溶性活性成分后的烟草残渣还可用于烟草蛋白质、绿原酸、芸香苷、多糖、烟碱的提取，实现了烟草活性成分的梯次利用，提高了烟草资源尤其是废弃烟草的利用价值。

主权项

1.一种从烟草中同时提取茄尼醇、西松烷二萜、维生素E、植物甾醇的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(1)提取：将烟叶去筋、干燥、粉碎，用非极性有机溶剂提取，非极性有机溶剂为正己烷或石油醚，提取液合并，减压浓缩至浸膏状，获得烟草脂溶性粗提物浸膏，同时回收溶剂；(2)皂化：将以上步骤获得的烟草脂溶性粗提物浸膏在碱性条件下进行皂化，皂化过程采用氢氧化钠和95％乙醇按照质液比g/ml为1:60组成的皂化液，皂化完成后，调pH值至中性并浓缩除去有机溶剂，然后加入一定量的水，用非极性有机溶剂萃取并浓缩至浸膏，所述非极性有机溶剂为正己烷或石油醚，获得茄尼醇脂溶性活性成分混合物；(3)葡聚糖凝胶柱分离：将以上步骤获得的脂溶性活性成分混合物以体积比二氯甲烷：甲醇＝1:1的混合液作为溶解液和洗脱剂通过Sephadex LH20凝胶柱分离，收集洗脱液，分别获得茄尼醇粗品、维生素E和植物甾醇混合物、西松烷二萜粗提物；(4)硅胶柱层析a：步骤(3)获得的茄尼醇粗品采用石油醚溶解，以石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂进一步通过硅胶柱层析进行梯度洗脱，并通过结晶精制后获得茄尼醇；(5)硅胶柱层析b：步骤(3)获得的维生素E和植物甾醇混合物用石油醚溶解，通过硅胶柱层析，以石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱，在石油醚:乙酸乙酯＝15:1条件下，收集维生素E馏分；在石油醚:乙酸乙酯＝10:1条件下，收集植物甾醇馏分；(6)硅胶柱层析c：步骤(3)获得的西松烷二萜粗提取物通过硅胶柱层析，先用体积比石油醚：乙酸乙酯＝5:1的混合溶剂洗脱，至无馏分流出，再用体积比石油醚：乙酸乙酯＝3:1的混合溶剂洗脱，收集第二馏分合并、浓缩，浓缩物进一步通过200‑300目的硅胶柱层析，以体积比氯仿：丙酮＝5:1的洗脱剂进行分离洗脱，分别获得抗肿瘤先导化合物——β‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇和α‑4，8，13‑西柏三烯‑1，3‑二醇；烟叶提取后的残渣用于蛋白质、烟碱、绿原酸、芸香苷、糖的提取。