[发明专利]传染性法氏囊病病毒重组融合蛋白VP2-VP1及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201610389727.2 | 申请日： | 2016-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN106046172B | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 韦平;刘婷;陈果;焦鹏涛;姬中华;何秀苗;磨美兰;韦天超;黄腾 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N15/40;G01N33/569 |
| 代理公司： | 45104 广西南宁公平知识产权代理有限公司 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530004 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种传染性法氏囊病病毒重组融合蛋白VP2‑VP1，由VP1和VP2基因串联而成的VP2‑VP1融合基因所编码。试验显示，本发明构建的重组表达载体pVP2‑VP1，能够在重组大肠杆菌中稳定表达重组融合蛋白VP2‑VP1，Western‑blot证实该蛋白具有良好的抗原性。据此，发明人用所表达的重组融合蛋白VP2‑VP1作为抗原，建立了ELISA检测方法和试剂盒，应用该法进行IBDV抗体的间接ELISA检测，将有助于更好的应用于临床IBDV感染后鸡群抗体水平的检测。而试剂盒试用表明其具有敏感、特异、稳定性和重复性良好等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 传染性 法氏囊病 病毒 重组 融合 蛋白 vp2 vp1 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种传染性法氏囊病病毒重组融合蛋白VP2-VP1，其特征在于：由VP1和VP2基因串联而成的VP2-VP1融合基因所编码，所述VP2-VP1融合基因具有序列表SEQ.ID.No.2的碱基序列；具体制法为：在于通过将VP2、VP1基因主要抗原区域基因片段串联，克隆入原核表达载体pET-32a得到重组表达载体pVP2-VP1，将该重组表达载体pVP2-VP1转入大肠杆菌BL21(DE3)，该重组大肠杆菌经0.5mM IPTG诱导表达，经Ni柱亲和层析纯化获得重组融合蛋白VP2-VP1，所述重组融合蛋白VP2-VP1具有序列表SEQ.ID.No.1的氨基酸序列；其中，/n基因片段VP2、VP1PCR扩增所用引物分别为：/nVP2F：CGCGGATCCATGACAAACCTGCAAGATCAAACCC；/nVP2R：CCCCGAATTCTGTAATTGTCACTCCACCTGCTTGG；/nVP1F：CCCCGAATTCGAGATCCTTGCCGAACTGAAC；/nVP1R：CCCGCTCGAGCTATTGGCGGCTCTCCTTCTG。/n
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