[发明专利]植物mRNA提取方法

摘要

植物mRNA提取方法，本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及用针灸针从植物材料中提取mRNA的技术领域。为了解决传统方法提取mRNA操作复杂，效率低，且损害植物材料的问题。本发明的植物mRNA提取方法按以下步骤进行：一、针灸针的处理，二、将干燥后的针灸针放入三甲氧基硅烷、二甲苯和二异丙基乙胺混合溶液中孵化，三、包埋针灸针，使多聚胸腺嘧啶吸附在针灸针表面，四、用高压灭菌超纯水洗脱包埋后的针灸针，五、将自然干燥后的针灸针扎入幼嫩植物材料的目的基因检测部位保持1min～3min，拔出针灸针放入焦碳酸二乙酯水的PCR管中，即完成植物mRNA提取。本发明提供的方法不需要提取其总RNA，能够在1min～3min内从植物材料中提取到mRNA，操作过程简便、快捷。

主权项

植物mRNA提取方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：一、针灸针的处理：将针灸针放入棕色瓶中，在超声波清洗机中，依次用己烷、丙酮和乙醇溶液震动清洗针灸针；再将棕色瓶放在75℃～82℃烘箱中干燥；二、将干燥后的针灸针放入三甲氧基硅烷、二甲苯和二异丙基乙胺混合溶液中孵化，在75℃～82℃条件下培养10h～16h；所述二异丙基乙胺、二甲苯与三甲氧基硅烷的体积比为1：(70～80)：(20～30)；三、用48℃～52℃的乙酸乙酯溶液清洗培养后的针灸针3～5次，然后将针灸针放入0.1ΜKOH与0.1‑0.5μg/ml多聚胸腺嘧啶的混合溶液中，在35℃～40℃条件下包埋4h～8h，使多聚胸腺嘧啶吸附在针灸针表面；所述KOH与多聚胸腺嘧啶的体积比为(95～100)：1；四、用高压灭菌超纯水洗脱包埋后的针灸针，将洗脱后的针灸针放在空气中自然干燥；五、将自然干燥后的针灸针扎入幼嫩植物材料的目的基因检测部位保持1min～3min，拔出针灸针放入装有8uL～12uL焦碳酸二乙酯水的PCR管中，即完成植物mRNA提取。