[发明专利]具有抗补体和降血糖活性的辣木叶黄酮及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了具有抗补体和降血糖活性的辣木叶黄酮的制备方法与应用。该制备方法先将辣木干叶粉加入乙醇溶液进行超声提取；依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对提取浓缩液进行分级萃取；将萃取液进行减压浓缩、真空冷冻干燥得到粉末A；将粉末A溶于乙醇中，过聚酰胺树脂层析柱，采用乙醇溶液依次进行梯度洗脱，冷冻干燥得粉末B；将粉末B溶于甲醇中，过葡聚糖凝胶LH‐20层析柱，甲醇洗脱，收集合并洗脱液，浓缩、冷冻干燥得粉末C；将粉末C溶于甲醇中，用制备液相反相C18柱进行梯度洗脱，收集30％～35％甲醇洗脱出来的化合物峰，浓缩、冷冻干燥。所得黄酮粉末纯度达99％以上，具有较强的抗补体和α‐葡萄糖苷酶抑制活性。

主权项

1.具有抗补体和降血糖活性的辣木叶黄酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：/n(1)将辣木叶粉末与浸提溶剂按料液比混合搅拌均匀，进行超声提取，得提取液，离心得到上清液，将滤渣进行二次提取，离心，合并上清液；分别以克和毫升作为单位，所述料液比为1:25～1:45；以体积百分比计，所述浸提溶剂为60～80％乙醇；所述的超声提取条件为：提取温度为40～70℃，提取时间为30～70min，超声功率为100～300W；/n(2)取上清液进行旋转蒸发浓缩，得到浓缩液；/n(3)将浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯进行萃取，再用正丁醇进行萃取，得到正丁醇萃取液，将正丁醇萃取液进行旋转蒸发浓缩、冷冻干燥得到粉末A；/n(4)利用聚酰胺树脂层析柱纯化步骤(3)得到的粉末A，洗脱溶剂为乙醇水溶液，以体积百分比计，薄层色谱进行跟踪，收集30％乙醇的第3～7倍柱体积的洗脱液，旋转蒸发浓缩、冷冻干燥得粉末B；/n(5)利用葡聚糖凝胶LH-20柱层析纯化步骤(4)得到的粉末B，洗脱溶剂为甲醇水溶液，以体积百分比计，薄层色谱进行跟踪，收集60～80％甲醇洗脱液，旋转蒸发浓缩、冷冻干燥，得到粉末C；/n(6)将粉末C溶于甲醇中，控制粉末C在溶液中的浓度为3～5mg/mL；用制备液相反相C18柱进行梯度洗脱，收集30％～35％甲醇洗脱出来的化合物峰，HPLC进行跟踪，合并相同组分，旋转蒸发浓缩、冷冻干燥，得辣木叶黄酮固体粉末产品D；/n所述的黄酮固体粉末D主要为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷，纯度达99％以上，其化学式为：/n