[发明专利]一种福瑞鲤成熟卵巢组织冷冻切片的制作方法在审
| 申请号： | 201610363464.8 | 申请日： | 2016-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN106053126A | 公开（公告）日： | 2016-10-26 |
| 发明（设计）人： | 王兰梅;董在杰 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | G01N1/06 | 分类号： | G01N1/06;G01N1/36;G01N1/42 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 殷红梅;张仕婷 |
| 地址： | 214081 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种福瑞鲤成熟卵巢组织冷冻切片的制作方法，属于组织切片技术领域。其从福瑞鲤中取出成熟卵巢组织，经过固定、去脂、脱水、包埋和冷冻切片后得到福瑞鲤成熟卵巢组织冷冻切片。相较于一般的冷冻切片法，本发明通过纯丙酮去脂，可高效去除福瑞鲤卵巢发育后期过多的脂肪，从而获得高质量、结构更清晰的卵巢冷冻切片。为福瑞鲤卵巢基因的免疫组化等组织定位以及功能研究提供重要且可靠的分子实验材料，并对福瑞鲤优良经济性状的分子机制探讨具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 福瑞鲤 成熟 卵巢 组织 冷冻 切片 制作方法 | ||
【主权项】：
一种福瑞鲤成熟卵巢组织冷冻切片的制作方法，其特征是步骤如下：（1）固定：从福瑞鲤中取出卵巢组织，切取适合大小的样品块用 1×PBS缓冲液冲洗后置于质量浓度为3.5%‑4.5%的多聚甲醛中过夜固定；（2）去脂：取出步骤（1）固定后所得卵巢组织，放入纯丙酮中处理2‑3h；（3）脱水：取出步骤（2）所得去脂后的卵巢组织，用1×PBS缓冲液冲洗后，置于质量浓度为10%‑30%的蔗糖溶液中脱水，直至一般组织沉底；（4）包埋：从步骤（3）的蔗糖溶液中取出组织，用1×PBS缓冲液冲洗后，采用OTC包埋剂在冷冻切片机里‑20~‑30℃下冷冻包埋；（5）冷冻切片：将步骤（4）所得包埋块切成合适大小，然后在冷冻切片机上切片；将切片贴到载玻片上，‑80℃冰箱冷冻保存。
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