[发明专利]一种利用酶催化制备富含EPA和DHA甘油酯的方法

摘要

本发明属于油脂深加工、改性技术领域，具体公开了一种利用酶催化制备富含EPA和DHA甘油酯的方法。本发明以富含EPA和DHA的鱼油为原料，利用脂肪酶高效选择性催化鱼油水解，并通过严格控制酶添加量、pH、水油比、温度、时间等水解条件，通过分子蒸馏分离提纯，获得富集了EPA和DHA的甘油酯。为提高原料利用率，本发明还通过尿素包裹法回收分子蒸馏所得游离脂肪酸产物中的EPA和DHA，使之乙酯化后与分子蒸馏所得已富集了EPA和DHA的甘油酯进行进酯交换反应，还进一步提高了甘油酯中的甘三酯成分以及EPA和DHA成分。本发明方法所获得的甘三酯型鱼油中的EPA和DHA可分别提高到25％和15％以上。

主权项

1.一种利用酶催化制备富含EPA和DHA甘油酯的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将一定量的鱼油、缓冲溶液和酶加入反应容器中，充入惰性气体保护,在搅拌或震荡下加热反应一段时间；反应结束，将所得混合物离心后分液，上层为油相，下层为水相；所述缓冲液和鱼油的体积质量比为0.5:1–3:1；酶的添加量为鱼油质量的0.1–0.5‰；所述缓冲溶液为0.1mol/L的磷酸盐缓冲溶液，缓冲溶液的pH值为5–9；所述酶为脂肪酶或磷脂酶；所述反应温度为25–50℃；所述反应时间为8–24h；所述搅拌或震荡的转速为200r/min；(2)将步骤(1)所得上层油相进行分子蒸馏，收集所得重相和轻相；(3)取一定量的尿素、乙醇以及步骤(2)分子蒸馏所得轻相，在均匀搅拌下，于65℃加热回流1h，然后冷却至室温；将混合物在低温条件下静置一段时间；然后进行过滤，收集滤液，真空旋转蒸发得到浅黄色固状物，用石油醚萃取固状物数次，得到富集了游离EPA和DHA的混合脂肪酸；(4)将一定量步骤(3)得到的富集了游离EPA和DHA的混合脂肪酸、无水乙醇和脂肪酶加入到反应容器中；在搅拌、惰性气体保护以及40℃的条件下反应12h；反应后旋蒸，过滤，得到富含EPA和DHA的乙酯；(5)将一定量的步骤(2)所得重相、步骤(4)所得富含EPA和DHA的脂肪酸乙酯、以及脂肪酶加入到反应容器中，并充入惰性气体保护，在搅拌、60℃和抽真空的条件下反应6h，反应结束后，过滤；再通过分子蒸馏分离产物，收集所得重相，即为富集了EPA和DHA的甘油三酯型鱼油。