[发明专利]一种提高酪酸菌生长效率的方法

摘要

本发明公开了一种提高酪酸菌生长效率的方法，属于食品发酵领域。本发明是一种通过降低发酵过程酸性产物的生成、促进乙醇的合成来提高酪酸菌生长效率的方法，具体为在酪酸菌三级发酵0‑8 h时，开始无菌、无氧匀速流加乙醛溶液至发酵结束前4‑6 h，乙醛总浓度为1.5‑5.0 mmol/L。本发明将乙醛分子作为代谢调控分子使用，乙醛分子的添加促进NADH的氧化效率、显著增强了乙醇的合成效率，而且还使乙酸、丁酸的生成效率显著降低，进一步提高了酪酸菌的生长效率，产生了极好的技术效果。本发明具有材料易购、操作可控性高、适用于酪酸菌发酵生产的特点。

主权项

1.一种提高酪酸菌生长效率的方法，其特征在于：所述的方法为：在酪酸菌发酵0‑6h时，开始无菌、无氧匀速流加乙醛溶液至发酵结束前4‑6h，乙醛总浓度为1.5‑3.0mmol/L；所述的无菌、无氧流加乙醛溶液通过包括如下步骤的方法实现：将玻璃两通蓝盖补料瓶改造成三通蓝盖补料瓶，其中两通连接过滤器，第三通通过硅胶管连接补料针头；灭菌后，将瓶装氮气通过管件连接在三通蓝盖补料瓶的一个过滤器上，经过滤的无菌氮气通入补料瓶瓶底，置换空气后，灭菌的针头在火焰保护下扎入补料口，通过蠕动泵进行乙醛溶液补料；所述的方法包括如下步骤：(1)种子扩大培养与合瓶种子细胞的收集按无菌、无氧操作要求，从酪酸菌菌种冻干管接出细胞至厌氧管斜面培养基；36‑38℃培养12‑16h后，按无菌、无氧操作要求，加入10mL无菌、无氧水制备厌氧管种子液；120mL厌氧瓶装培养基30mL，按1‑2％的比例将酪酸菌厌氧管种子液接入厌氧瓶液体培养基中，36‑38℃、100r/min在摇床上培养12‑14h得到厌氧瓶种子液；按无菌、无氧操作要求，将厌氧瓶种子液进行合瓶操作，得到合瓶种子液；(2)二级种子培养装有培养基的二级种子罐灭菌、氮气置换除氧后，火焰保护下将合瓶种子液接入二级种子罐，按如下条件进行二级种子发酵培养：培养温度36‑38℃，转速为100r/min，氮气流量控制为0.1vvm，罐压控制为0.03‑0.04MPa，厌氧保护3h后，停止通氮气，发酵培养12‑14h后，得二级种子液；(3)三级发酵装有培养基的三级发酵罐灭菌、氮气置换除氧后，将二级种子液以1‑2％的接种量移种至三级发酵罐，按如下条件进行三级发酵：发酵温度36‑38℃，转速100r/min，氮气流量控制为0.1vvm，罐压控制为0.03‑0.04MPa，厌氧保护3h后，停止通氮气；发酵培养24h后，放罐；三级发酵培养0‑6h时，开始无菌、无氧匀速流加补入乙醛溶液至发酵结束前4‑6h，使乙醛总浓度为1.5‑3.0mmol/L。