[发明专利]表面展示猪流行性腹泻病毒S蛋白的重组杆状病毒在审
申请号: | 201610348237.8 | 申请日: | 2016-05-23 |
公开(公告)号: | CN106085969A | 公开(公告)日: | 2016-11-09 |
发明(设计)人: | 陈健;史翠萍;舒建洪;陈琴;杨芳 | 申请(专利权)人: | 杭州洪晟生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/50;C12N15/866;A61K39/215;A61P31/14 |
代理公司: | 嘉兴海创专利代理事务所(普通合伙) 33251 | 代理人: | 章松伟 |
地址: | 310018 浙江省杭州市下沙经济技*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供表面展示猪流行性腹泻病毒S蛋白的重组杆状病毒及其制备方法,该病毒以PEDV纤突蛋白S1基因为抗原基因,利用昆虫杆状病毒载体表达系统构建重组病毒,成功表达并展示S1蛋白于病毒表面。以该重组病毒作为PEDV伪病毒疫苗免疫接种小鼠,血清中和试验及淋巴细胞增殖实验分析表明该重组病毒能够激起有效的免疫保护作用。 | ||
搜索关键词: | 表面 展示 流行性 腹泻 病毒 蛋白 重组 杆状病毒 | ||
【主权项】:
一种表面展示猪流行性腹泻病毒S蛋白的重组杆状病毒,其特征在于:该病毒通过以下步骤构建而成:(1)根据猪流行性腹泻病毒CV777株S蛋白氨基酸序列,对S1区21‑789位氨基酸的核酸序列进行优化,并人工合成包含该S1基因的DNA序列SP‑S1‑TMD,如SEQ ID NO.1所示;(2)将SP‑S1‑TMD片段插入到Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统的转移载体的多克隆位点,构建重组质粒;(3)转化DH10Bac感受态细胞,蓝白斑筛选重组克隆;(4)将重组克隆转染昆虫细胞,培养后得到表面展示猪流行性腹泻病毒S蛋白的重组杆状病毒。
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