[发明专利]人小肠3D类器官研究P-糖蛋白模型的构建方法和应用有效
| 申请号： | 201610345283.2 | 申请日： | 2016-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN105950539B | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 王昕;赵军芳;曾之扬;张远金;李大力;刘明耀 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;G01N33/68;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 31257 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人小肠3D类器官研究P‑糖蛋白(P‑glycoprotein,P‑gp)模型的构建方法。本发明中，首先将人小肠隐窝接种于基质胶中，加入含有特定生长因子的ADMEM/F12培养基进行培养以形成3D类器官；然后进行形态观察，并从mRNA和蛋白水平检测P‑gp的表达；最后采用共孵育的方法，以罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)为底物，研究维拉帕米(Verapamil)和米托坦(Mitotane)对Rh123转运的影响。所述人小肠3D类器官研究P‑gp的模型可应用于P‑gp介导的药物转运研究，所述人小肠3D器官研究P‑gp的模型也可广泛应用于P‑gp抑制剂的体外高通量筛选，所述方法高效、快速。 | ||
| 搜索关键词： | 小肠 器官 研究 糖蛋白 模型 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种人小肠3D类器官模型，其特征在于，所述人小肠3D类器官模型的形状为三维中空球体；包括干细胞、潘氏细胞以及上皮细胞；所述人小肠3D类器官外侧模拟的是小肠基底侧，腔侧模拟的是小肠绒毛侧，并有P-gp的表达，其中，所述人小肠3D类器官模型的培养方法包括以下步骤：将人小肠隐窝混悬于基质胶中，取适量体积加入微孔板，然后加入含有Recombinant Human R-Spondin-1，Recombinant Murine Noggin，Recombinant MouseEpidermal Growth Factor，Recombinant Mouse Wnt-3a生长因子的ADMEM/F12培养基，37℃培养2天，得到所述的人小肠3D类器官模型。/n
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