[发明专利]蓝莓中总黄酚含量的测定

摘要

本发明具体涉及一种蓝莓果实中总酚含量测定的一种方法。其技术要点主要包括以下几个步骤：1)蓝莓中总酚的提取方法；2)测定总酚显色剂的制备；3)对照品溶液的配制；4)标准曲线的建立；5)样品总酚含量测定。本发明方法操作简便，成本较低，检测时间较短，精密度较高，重现性良好，稳定性较强。

主权项

一种蓝莓中总酚含量的测定，其特征在于，包括以下几个步骤：(1)蓝莓中总酚的提取方法精密称取蓝莓鲜果，组织破碎后按料液比1:10‑15比例加入含有体积分数0.1％盐酸的80％甲醇溶液，40℃超声提取30‑40min，过滤，滤渣按上述方法再提取一次，合并滤液；取滤液用旋转蒸发仪浓缩后加入3‑5倍体积乙酸乙酯进行萃取，萃取3‑5次，合并乙酸乙酯层萃取液，回收乙酸乙酯，浓缩物用80％甲醇定容，保存备用；(2)测定总酚显色剂的制备将Lowry法蛋白含量测定试剂盒中的A1、A2、A3按体积比100:1:1混合配成试剂A，放置30min后使用；将试剂B避光保存，测定时直接使用；(3)对照品溶液的配制精密称取没食子酸，用纯水定容，配制成浓度为3.0mg/mL溶液，再稀释配置成0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0、2.2mg/mL的没食子酸溶液；(4)没食子酸标准曲线的建立分别取步骤(3)中配置的没食子酸浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0、2.2mg/mL的对照品溶液于试管中，加试剂A，混匀室温放置10min，再加试剂B，立即混匀，室温放置30min，在750nm波长下，测定吸光度值，以未加对照品的一组做空白对照；以没食子酸浓度为横坐标x，吸光度为纵坐标y，建立标准曲线；(5)蓝莓样品中总酚的测定精密量取步骤(1)中得到的蓝莓样品提取溶液0.1mL于刻度试管中，加入A试剂5mL，混匀后室温放置10min，加入B试剂0.5mL，立即混匀，室温放置30min，以未加没食子酸试管为空白对照，于750nm波长处测定吸光度；重复测定三次，所得数据计算平均值，对照标准曲线可得各品种蓝莓样品中总酚的浓度，计算当量mg每食子酸/g果实。