[发明专利]贝芪益肺片及鉴别和含量测定方法

摘要

本发明涉及一种中药的检测方法，即贝芪益肺片及鉴别和含量测定方法。用于肺痨的中药组合物贝芪益肺片，特别适用于继发性肺结核气阴耗伤证。选取百部，鱼腥草，白及，三七为鉴别项，通过参数试验筛选，实现色谱条件较好、专属性及重现性良好、快速、经济实用。选取了黄芪含量测定方法，使得本方法专属性强，准确度高，有效提高了产品质量，更好的保证了产品的疗效。工艺、检测方法合理、适用、有效。

主权项

一种贝芪益肺片的鉴别和含量测定方法，其特征在于步骤如下：一、贝芪益肺片制备：贝芪益肺片由黄芪200g，百合100g，麦冬100g，平贝母80g ，炙 百部150 g ，桔梗100g ，胡黄连150g ，猫爪草120g ，鱼腥草150g ，白及100g，三七50g制成；以上十一味，三七、白及粉碎成细粉，钴‑60射线辐照灭菌；平贝母、百部、鱼腥草加70﹪乙醇提取2次，第一次2小时，第二次1小时，合并提取液，真空减压回收乙醇，浓缩至相对密度1.25～1.28的清膏；药渣与其余黄芪共六味原料药加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述清膏合并，浓缩至相对密度为1.30～1.32的稠膏，加入三七、白及细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，加入淀粉，制成颗粒，干燥，加入硬脂酸镁4g，压制成1000片，包薄膜衣，即得；二、鉴别（1）白及的鉴别：取本品10片，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，再加盐酸2ml，加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取两次，每次40ml，合并乙醚液，挥干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液；另取白及对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯‑乙酸乙酯＝15:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸试液；供试品色谱中与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（2）鱼腥草的鉴别：取本品10片，研细，加乙酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取鱼腥草对照药材3g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷‑乙酸乙酯＝9：1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的兰色荧光斑点；（3）百部的鉴别：取本品8片，研细，加90﹪乙醇20ml与2﹪盐酸1ml，加热回流20分钟，放置过夜，滤过，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调pH值至10以上，用三氯甲烷提取三次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加90%乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取百部对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15µl，对照药材溶液3µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板上，以三氯甲烷‑甲醇＝10：1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同的红色斑点；（4）三七的鉴别：取本品8片，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干；残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水10ml使溶解，放冷，通过中性氧化铝柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用70％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取三七皂苷R₁对照品、人参皂苷Rg₁对照品，加甲醇制成每１ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15µl，对照品溶液2µl，分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以三氯甲烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水＝15:40:22:10，10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；三、含量测定取本品15片，研细，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇，水浴中加热回流提取4小时，提取液回收甲醇至干；残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水10ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，内径1.5cm，长12cm，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每１ml含１mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10µl，对照品溶液2µl与4µl，分别交叉点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以三氯甲烷‑甲醇‑水＝65:35:10，10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶带固定，照薄层色谱法进行扫描，波长：ë_S=530nm，ë_R=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。