[发明专利]草莓移栽苗组培方法

摘要

草莓移栽苗组培方法，步骤包括：A、草莓外植体的选取，B、消毒灭菌，C、抗褐化培养，D、愈伤组织诱导，丛芽发生和增殖培养，E、扩繁培养，F、生根培养，G、炼苗和移栽。其有益效果是，草莓苗组培程序简单，可在同一培养基中同时进行愈伤组织诱导、丛芽发生和增殖培养；组培周期短、繁殖系数高，整个快速繁殖过程只需三种培养基就解决了褐化现象、愈伤组织、丛芽发生和增殖、以及生根问题；试管苗不定根诱导未添加植物激素，炼苗移栽成活率高，生长迅速；种苗可保持同一基因型，繁殖后代不易褐化、病毒积累很少；抑制褐化的组培方法，成本低、时间短、育出的苗品质好且成活率高，性状稳定，能满足草莓高品质种苗的工厂化生产需求。

主权项

草莓移栽苗组培方法，其特征在于，包括以下步骤：A、草莓外植体的选取：选择长势良好、无病虫害、无畸形的健壮草莓植株，取其匍匐茎带节茎段，用手术刀切割为约2~3 cm长，获得草莓外植体；B、消毒灭菌：将外植体先用自来水清洗表面的泥土和灰尘，再将外植体用质量比为10%的洗衣粉溶液浸泡10 min，轻微震荡搅动后，流水冲洗30 min，置于超净工作台上的器皿中；再用质量比为50%的维生素C溶液浸泡 3 min，用体积比为75%乙醇溶液处理10~15 s，再经质量比为0.1%的汞水溶液消毒8~10 min，最后用无菌水冲洗5~6次，每次不低于3 min，在整个消毒过程中充分摇动器皿；C、抗褐化培养：在每升蒸馏水中加入20000~30000 mg的硫代硫酸钠，100~150 mg的维生素C，1.0~5.0mg的活性炭，1.0~10 mg的氯化钠，30000 mg的蔗糖和5300 mg的琼脂粉配制成培养基Ⅰ，培养基Ⅰ的PH值在5.4~5.8之间；将经消毒灭菌的外植体接入培养基Ⅰ中进行培养，间隔7 d后，将外植体转接到另一个相同的新鲜培养基Ⅰ中进行培养，外植体共转接3次完成抗褐化处理；D、愈伤组织诱导，丛芽发生和增殖培养：在每升蒸馏水中加入1.0~1.5 mg的6‑苄胺基嘌呤，0.1~1.0 mg的萘乙酸，0.05~0.1 mg的2,4‑二氯苯氧乙酸，30000 mg的蔗糖，5300~5500 mg的琼脂制成培养基Ⅱ，培养基Ⅱ的PH值在5.4~5.8之间；将C中得到的外植体接入到培养基Ⅱ中，在光照度为1500~2000 lx，光照时间为12 h/d，温度控制在22±1 ℃的条件下进行愈伤组织诱导，丛芽发生和增殖培养，5 d后在其节部和基部出现愈伤组织；10 d后愈伤组织迅速增殖，其表面开始出现绿色芽点；15 d后分化出不定芽丛；E、扩繁培养：将D步骤中15 d后分化出不定芽丛进行无菌分切，切成4‑6株一丛，分别转接到另一个相同的新鲜培养基Ⅱ中，进行扩繁，培养30 d后，扩繁培养出种苗；F、生根培养：在每升蒸馏水中加入1.0 mg的活性炭，10000 mg的蔗糖，5300‑5500 mg的琼脂粉配制成培养基Ⅲ，培养基Ⅲ的PH值在5.4~5.8之间；取E步骤中高3~4 cm的健壮种苗，接种于培养基Ⅲ中，放在光照度为1500~2000 lx，光照时间为12 h/d，温度控制在22±1 ℃的条件下培养，培养45 d后获得苗壮根粗的生根苗；G、炼苗和移栽：取6~8 cm高的生根苗，连培养瓶一起置于室温下炼苗3 d后，打开瓶盖，从培养基中取出幼苗，将幼苗上残留培养基清洗干净，放入浓度为0.1~0.2%的多菌灵溶液中消毒2~3 min后，移栽至消毒后的沙土基质中保温保湿培养，生长30 d后，即得移栽苗。