[发明专利]继发性肺结核患者调节性T细胞频率的检测方法在审
申请号: | 201610319803.2 | 申请日: | 2016-05-13 |
公开(公告)号: | CN105925688A | 公开(公告)日: | 2016-09-07 |
发明(设计)人: | 武学成;唐曙明;冀红霞;王佃鹏 | 申请(专利权)人: | 深圳市龙华新区慢性病防治中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 518131 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了继发性肺结核患者调节性T细胞频率的检测方法。本发明公开的方法包括:利用引物对与探针对含有FOXP3 TSDR DNA片段的标准质粒进行荧光定量PCR,确定M,M为不同FOXP3 TSDR拷贝数与荧光定量PCR体系中荧光强度的对应关系;将625‑1000个调节性T细胞混于(0.5‑10)×106个单个核细胞中,得到混合细胞;利用引物对与探针对混合细胞的基因组DNA进行荧光定量PCR,依据M确定FOXP3TSDR拷贝数与调节性T细胞频率的关系;利用荧光定量PCR检测待测对象FOXP3TSDR拷贝数,根据FOXP3TSDR拷贝数与调节性T细胞频率的关系确定待测对象调节性T细胞频率。 | ||
搜索关键词: | 继发性 肺结核 患者 调节 细胞 频率 检测 方法 | ||
【主权项】:
调节性T细胞频率的检测方法,包括:通过荧光定量PCR确定FOXP3TSDR拷贝数与调节性T细胞频率的关系;利用荧光定量PCR检测待测对象FOXP3TSDR拷贝数,根据所述FOXP3TSDR拷贝数与调节性T细胞频率的关系确定所述待测对象调节性T细胞频率;所述通过荧光定量PCR确定FOXP3TSDR拷贝数与调节性T细胞频率的关系包括:a1)利用引物对与探针对含有FOXP3TSDR或其DNA片段的标准质粒进行荧光定量PCR,确定M,所述M为不同FOXP3TSDR拷贝数与荧光定量PCR体系中荧光强度的对应关系;a2)将625‑1000个调节性T细胞混于(0.5‑10)×106个单个核细胞中,得到混合细胞;利用所述引物对与所述探针对所述混合细胞的基因组DNA进行荧光定量PCR,依据所述M确定FOXP3TSDR拷贝数与调节性T细胞频率的关系。
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