[发明专利]一种同步检测绿茶中羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的方法

摘要

本发明涉及分析检测技术领域，为解决目前检测CML和CEL方法中存在不同原料基质会影响检测方法的问题，本发明提出了一种同步检测绿茶中羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的方法，以d₄‑CML和d₄‑CEL为内标，采用多选择反应监测模式，通过方法学论证，构建了同步测定绿茶中CML和CEL的定量分析方法，为茶叶中AGEs的监测和控制提供基础。本发明的检测方法准确性、重现性、稳定性较好，适于绿茶中CML和CEL的实际检测。

主权项

1.一种同步检测绿茶中羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的方法，其特征在于，所述的检测方法为：（1）对茶叶粉末样品脱脂处理，然后将样品吹干后依次加入硼酸钠缓冲液和硼氢化钠溶液，在0‑6℃还原2‑10h，再加入氯仿和甲醇混合液，离心后向得到的沉淀物中加入酸溶液，水解反应，完成后将水解样品进行定容、过滤并收集滤液；所述的硼酸钠缓冲液浓度为0.1‑0.3 mol/L，硼氢化钠浓度为0.8‑1.2 mol/L，pH调节为8.5‑10.0，所述的茶叶粉末样品、硼酸钠缓冲液和硼氢化钠溶液的重量体积比为1g：8‑12 mL：4‑6 mL；（2）取滤液，定量加入同位素标记羧甲基赖氨酸和同位素标记羧乙基赖氨酸的标准溶液，得到预处理样品；（3）净化：采用固相萃取柱对预处理样品进行净化处理，得到待测样品；（4）采用高效液相色谱串联质谱法对待测样品进行检测，通过内标法计算羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的含量；高效液相色谱测定条件为：流动相A包括体积百分比浓度为0.1%甲酸溶液与浓度8‑12 mmol/L的乙酸铵，流动相B为乙腈，梯度洗脱程序，流速0.2 mL/min，进样量10 μL，柱温38‑42℃，所述的梯度洗脱程序为：。