[发明专利]双gRNA、双gRNA文库、双gRNA载体文库及其制备方法和应用有效
申请号: | 201610312039.6 | 申请日: | 2016-05-11 |
公开(公告)号: | CN106967716A | 公开(公告)日: | 2017-07-21 |
发明(设计)人: | 丁先锋;莫寅元 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C40B40/06;C40B50/06;C40B40/02 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 310018 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种双gRNA、双gRNA文库、双gRNA载体文库及其制备方法和应用。该双gRNA由第一启动子、gRNA‑a、crRNA支架序列、第二启动子和gRNA‑b顺次连接而成。该双gRNA文库包括针对靶基因的多个双gRNA。该双gRNA载体文库即由该双gRNA文库与载体连接而成。本发明的双gRNA中,gRNA‑a和gRNA‑b分别由不同的启动子控制其独立表达,并分别与靶基因上的两个靶位点互补配对,这使得该双gRNA能够招募Cas9核酸酶在两个sgRNA作用位点对靶基因进行剪切,有效提高靶基因的敲除效率。 | ||
搜索关键词: | grna 文库 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种双gRNA,其特征在于,由第一启动子、gRNA‑a、crRNA支架序列、第二启动子和gRNA‑b顺次连接而成。
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