[发明专利]一种可用于筛选粪便中具有抗癌活性微生物的方法在审
申请号: | 201610310988.0 | 申请日: | 2016-05-12 |
公开(公告)号: | CN105969685A | 公开(公告)日: | 2016-09-28 |
发明(设计)人: | 陈廷涛;辛洪波;杨少国 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20 |
代理公司: | 南昌市平凡知识产权代理事务所 36122 | 代理人: | 夏材祥 |
地址: | 330031 江西省南昌市红谷滩新区学府大道12*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | 一种可用于筛选粪便中具有抗癌活性微生物的方法,是分离无癌症村健康人粪便中的肠道微生物,经体外和体内实验筛选出具有抗癌活性的微生物。本发明直接对无癌症村健康人粪便的微生物进行分离培养,筛选出具有抗癌活性的微生物,具有筛选量大,可定向筛选的优点,有助于更好的开发利用具有抗癌活性的微生物资源。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 筛选 粪便 具有 抗癌 活性 微生物 方法 | ||
【主权项】:
一种可用于筛选粪便中具有抗癌活性微生物的方法,其特征是:(1)取样者的选择:样品取自无癌症村的健康老人,年龄在50‑60岁之间,6个月内没有使用过抗生素;(2)样品的收集和保存:收集无癌症村健康人的新鲜粪便,转人厌氧环境,加入甘油,其体积为粪便和甘油总体积的50%,旋涡振荡器混匀,‑80 ℃保存; (3)样品菌群的分离与鉴定:培养基的配制,培养,挑菌接种,革兰染色,测序验证;(4)体外研究细菌的生长特性:酸碱耐受实验酸,胆盐耐受实验,最适生长温度的确定,抑菌实验;(5)体外实验筛选具有抗癌活性的微生物:细胞粘附实验,癌症细胞生长抑制实验,western blot法检测炎症因子的表达水平;(6)体内建立癌症小鼠模型评价所筛选微生物的抗癌活性的强度:癌症模型的建立,ELISA 法测定血清中TNF‑α ,IL‑6、IL‑8蛋白表达,western blot法检测炎症因子的表达水平;(7)确定有抗癌活性的微生物:综合上述结果,确定和筛选出具有抗癌活性的微生物。
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