[发明专利]一种定量测定植物糖代谢中的糖酵解和磷酸戊糖途径份额的方法

摘要

本发明公开了一种定量测定植物糖代谢中的糖酵解和磷酸戊糖途径份额的方法。它包括以下步骤：选取待测植株，取第二、第三和第四完全展开叶各一片剪碎充分混合，取其中0.1g进行酶液的提取，分别测定提取的酶液中以单位体积单位时间吸光度变化值表示的磷酸果糖激酶活力和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的酶活力，依据公式计算出糖代谢中的糖酵解途径份额、磷酸戊糖途径份额以及糖酵解途径和磷酸戊糖途径的比例。本发明能快速定量不同环境下植物体糖代谢中的糖酵解途径份额、磷酸戊糖途径份额以及糖酵解途径和磷酸戊糖途径的比例，步骤少，计算简单，测定结果具有可比性以及可靠性，可以整体反映植物在环境变化时葡萄糖代谢的歧化情况。

主权项

1.一种定量测定植物糖代谢中的糖酵解和磷酸戊糖途径份额的方法，其特征在于：它包括以下步骤：第一，选取待测植株，取第二、第三和第四完全展开叶各一片；第二，将上述叶片剪碎充分混合，取其中进行酶液的提取；第三，测定上述提取的酶液中以单位体积单位时间吸光度变化值表示的磷酸果糖激酶活力EApfk；第四，测定上述提取的酶液中以单位体积单位时间吸光度变化值表示的葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的酶活力EAg6pdh；第五，将磷酸果糖激酶的酶活力EApfk与葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的酶活力EAg6pdh累加获得糖代谢关键酶的总活性EA∑，计算公式为EA∑＝EApfk+EAg6pdh；第六，依据磷酸果糖激酶的酶活力EApfk和糖代谢关键酶的总活性EA∑，计算出糖代谢中的糖酵解途径份额PEMP，计算公式为PEMP＝EApfk/EA∑；第七，依据葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的酶活力EAg6pdh和糖代谢关键酶的总活性EA∑，计算出糖代谢中的磷酸戊糖途径份额PPPP；计算公式为PPPP＝EAg6pdh/EA∑；第八，依据糖代谢中的糖酵解途径份额PEMP和糖代谢中的磷酸戊糖途径份额PPPP，计算出糖代谢中的糖酵解途径和磷酸戊糖途径的比例P，计算公式为P＝PEMP/PPPP。