[发明专利]一种豆类松散型胚性愈伤组织的通用诱导方法有效
申请号: | 201610291459.0 | 申请日: | 2016-05-05 |
公开(公告)号: | CN105875413B | 公开(公告)日: | 2018-01-16 |
发明(设计)人: | 古瑜;刘艳军;韩启厚;于海龙 | 申请(专利权)人: | 天津科润农业科技股份有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司12207 | 代理人: | 朱红星 |
地址: | 300384 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种豆类松散型胚性愈伤组织的通用诱导方法,包括播种获得无菌苗,剪取无菌苗子叶、叶片和两叶片间的茎段作为外植体,接种到1号培养基上进行愈伤组织的诱导,15‑20天后,将诱导出的愈伤组织接种到2号培养基上进行胚性愈伤组织的诱导,在从愈伤组织到胚性愈伤组织的诱导过程中,每10‑15天继代培养一次,继代培养过程中,选取表面光滑的表层愈伤组织块进行转移,当继代培养4‑5次后,就完成了豆类胚性愈伤组织的诱导,该方法为标准的豆类松散型胚性愈伤组织的诱导体系。可以用于解决豆类愈伤组织诱导过程中由于愈伤组织整体结构和细胞形态不均一,导致诱导效率降低的问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 豆类 松散 型胚性愈伤 组织 通用 诱导 方法 | ||
【主权项】:
一种豆类松散型胚性愈伤组织的诱导方法,其特征在于按如下的步骤进行:(1)播种获得无菌苗:豆类种子首先使用20‑40%(w/w)次氯酸钠浸没,漂洗20‑30分钟后;然后无菌水冲洗3次,每次2‑3分钟,最后直接播种于MS培养基中,每瓶5‑6粒,待7‑10天后得到无菌苗;(2)剪取无菌苗子叶、叶片和两叶片间的茎段作为外植体,接种到1号培养基上进行愈伤组织的诱导;所述的1号培养基指的是:MS培养基+1mg/mL 2,4‑D;(3)15‑20天后,将诱导出的愈伤组织接种到2号培养基上进行胚性愈伤组织的诱导,在从愈伤组织到胚性愈伤组织的诱导过程中,每10‑15天继代培养一次,继代培养过程中,选取表面光滑的表层愈伤组织块进行转移;所述的2号培养基指的是:MS培养基+1mg/mL 6‑BA+1mg/mL 2,4‑D+1 mg/mL AgNO3;(4)当继代培养4‑5次后,就完成了豆类的胚性愈伤组织的诱导,该方法为标准的豆类松散型胚性愈伤组织的诱导体系;其中的豆类指菜豆、豇豆、豌豆、蚕豆。
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