[发明专利]肝组织HBVcccDNA定量PCR检测方法在审
申请号: | 201610289719.0 | 申请日: | 2016-05-04 |
公开(公告)号: | CN105755151A | 公开(公告)日: | 2016-07-13 |
发明(设计)人: | 陈延平;李春艳;刘志刚 | 申请(专利权)人: | 陈延平 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京国智京通知识产权代理有限公司 11501 | 代理人: | 孙文彬 |
地址: | 716099 陕西省延安市宝*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及肝组织HBVcccDNA定量PCR检测方法,包括以下步骤:提取肝组织中基因组DNA标本;β‑actin质粒标准品的构建:以成人外周血细胞的总RNA为模板、反转录合成cDNA,用该cDNA为模板PCR扩增人β‑actin基因相应的cDNA目的片段,再以pMD18‑T为载体,构建形成重组质粒,电泳、鉴定测序后,用荧光定量PCR制作β‑actin标准曲线。本发明能实现对肝组织中HBVcccDNA、β‑actin进行灵敏,特异的扩增,以及实现HBVcccDNA在肝细胞中的量化,可用于临床肝组织及肝细胞中HBVcccDNA的检测及应用。 | ||
搜索关键词: | 组织 hbvcccdna 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
肝组织HBVcccDNA定量PCR检测方法,其特征在于,包括以下步骤:提取肝组织中基因组DNA标本;构建肝组织内参基因β‑actin质粒标准品;以P1.2Ⅱ质粒作为检测HBVcccDNA的标准品,对标本的HBV cccDNA进行定量PCR扩增。
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