[发明专利]一种ATDC5向软骨分化的诱导方法有效
| 申请号： | 201610281335.4 | 申请日： | 2016-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN105838669B | 公开（公告）日： | 2019-08-20 |
| 发明（设计）人： | 任力;王迎军;薛婧晨;秦大江;裴端卿;蔡景蕾;宋文婧 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12N5/09 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 陈文姬 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种ATDC5向软骨分化的诱导方法，包括以下步骤：采用改进的micromass培养办法将已经团聚成micromass的细胞团整块吹起，随后转移到琼脂糖上悬浮软骨诱导，诱导时间为14天。本发明既满足软骨诱导所需的密集培养的条件，又可以避免与培养板直接接触而导致纤维软骨的形成，同时还可以利用琼脂糖促软骨分化的特性促进细胞的软骨分化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 atdc5 软骨 分化 诱导 方法 | ||
【主权项】：
1.一种ATDC5向软骨分化的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将ATDC5在生长培养基中生长至100％融合后，使用胰酶将其消化、收集、离心、去上清；(2)将步骤(1)所得的细胞使用ATDC5生长培养基重悬，得到细胞悬液；(3)将步骤(2)中的细胞悬液采用滴点法滴于细胞培养板中；(4)将步骤(3)得到的滴有细胞悬液的培养板放置在37摄氏度、5％的二氧化碳培养箱中2‑3小时；(5)将步骤(4)处理后的培养板取出，加入软骨诱导培养基，后将其放回37摄氏度、体积浓度为5％的二氧化碳培养箱中培养18～24小时；(6)将步骤(5)处理后的培养板取出，沿细胞团边缘将细胞团整个吹起，使用巴氏吸管将浮起的细胞团转移到铺有琼脂糖凝胶的细胞培养板中；(7)定期为步骤(6)中的细胞团更换诱导培养基，14天后收得诱导成功的细胞球。
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