[发明专利]液相色谱质谱联用测定青风藤中生物碱方法以及索氏提取、微波法提取青风藤中生物碱方法

摘要

本发明涉及一种液相色谱质谱联用测定青风藤中生物碱方法以及索氏提取、微波法提取青风藤中生物碱方法,液相色谱质谱联用测定青风藤中生物碱的方法，它包括以下步骤:样品溶液的制备；样品的分析；质谱条件；其中所述的样品溶液为对照品溶液、将青风藤进行索氏提取后所得到的溶液或者将青风藤进行微波提取后所得到的溶液；本发明的优点在于：本发明的色谱条件能够使各生物碱均得到很好的保留；本发明的液相色谱质谱联用测定青风藤中生物碱的方法不仅为青风藤的分析提供了一种新的方法，而且为青风藤中药品质的鉴定和应用提供参考；本发明的微波法提取青风藤中生物碱的方法，提取时间短、节约溶剂、提取高效。

主权项

1.一种液相色谱质谱联用测定青风藤中生物碱的方法，其特征在于：它包括以下步骤:（1）样品溶液的制备； （2）样品的分析：色谱条件：色谱柱采用Agilent ZORBAX SB‑C18 ，3.0mm×250mm, 5μm；流动相为：A相：甲醇、B相：4~8 mM醋酸铵水溶液；梯度洗脱条件：0‑7min ：55‑45％ B ；7‑25min ：45‑25％ B ；25‑26min ：25‑10％ B ；26‑30min ：10％ B ；30‑31min ：10‑55％ B ；31‑35min ：55％ B ；流速：流速0.3~0.5 mL/min；柱温：30 ~35℃；进样量：5~10 μL；（3）质谱条件：离子源：电喷雾电离源ESI；扫描方式：正离子扫描；离子扫描的范围为100~700 m/z；干燥气N2流速：6‑8 L/min，温度为300~350 ℃；雾化气N2压力为35~40 psi；毛细管电压： 3.0~3.5 kV；毛细管出口电压：100 V；终板偏置电压： ‑500 V~‑400 V；其中，步骤（1）中的样品溶液为对照品溶液，所述的对照品溶液的配制方法如下：将待分析的青风藤中的生物碱标准品溶解在1.00~1.5 mL的无水乙醇中，配置成10‑3 mol/L的母液并置于3~5℃冰箱中保存；或者步骤（1）中的样品溶液为待测品溶液；所述待测品溶液的制备方法具体为：称取过50~70目筛的青风藤中药粉末1.0 g，装于滤纸筒中，将开口端折叠封住，放于索氏提取筒中，用70~80 mL的65~75%的乙醇回流提取8~10 h，冷却后将提取液倾倒入旋转蒸发烧瓶中，残渣中加入70~80 mL的65~75%的乙醇回流提取5~6 h，提取液冷却后，与第一次提取液合并加入蒸发烧瓶中，在90~100℃条件下旋转蒸发2‑3 h，得到浓缩液，待浓缩液冷却后，用60~70%的无水乙醇溶液于25mL容量瓶中定容，放于3~5℃冰箱中保存；所述待测品溶液的制备方法或者具体为：精确称取过50~70目筛的青风藤粉末1.0 g置于150 mL的烧瓶中，往烧瓶中加入料液比为1:30~1:40的65%~75%的乙醇溶液，得青风藤乙醇溶液，将青风藤乙醇溶液在微波功率为450~550W、提取温度为55~65℃条件下，提取10~20min，冷却后用真空抽滤泵抽滤，得滤液，弃去药渣，然后将滤液转移至25mL容量瓶中定容，于3~5℃冰箱保存。