[发明专利]利用截短柔性残基提高普鲁兰酶催化性能的方法有效
| 申请号： | 201610259979.3 | 申请日： | 2016-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN105734034B | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 聂尧;徐岩 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/44 | 分类号： | C12N9/44;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了利用截短柔性残基提高普鲁兰酶催化性能的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过去除Bacillus naganoensis JNB‑1普鲁兰酶的氨基酸序列的N端的前5、22、45、64、78、106位氨基酸以及C端的后9、36位氨基酸，获得的所有突变酶的Km值都降低了，说明截短提高了酶与底物的亲和力；此外PulΔN5和PulΔN106的酶活分别比野生酶提高了42％、17％，PulΔN5、PulΔN106、PulΔC9的比活力分别比野生酶提高了21％、15％，PulΔN5、PulΔN78、PulΔC9的半衰期分别比野生型提高了10h、12h、24h，PulΔN5、N45、PulΔN78、PulΔN106和PulΔC9的kcat/Km值提高，说明突变酶拥有更高的催化效率。本发明的普鲁兰酶更适合工业应用。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 柔性 残基 提高 普鲁兰酶 催化 性能 方法 | ||
【主权项】：
1.一种普鲁兰酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列相对于Bacillus naganoensis 来源的普鲁兰酶的氨基酸序列，发生了N端前5个、22个、45个、64个、78个或106个氨基酸的截短或C端最后9个或最后36个氨基酸的截短；所述Bacillus naganoensis 来源的普鲁兰酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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