[发明专利]一种猪细环病毒2型环介导等温扩增试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201610259446.5 | 申请日： | 2016-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN105779656B | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 陈忠伟;何颖;段群棚;周英宁;赵武;秦毅斌;卢冰霞;李斌;梁家幸;杨思仪;蒋冬福;苏乾莲 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/93 |
| 代理公司： | 44214 广州市红荔专利代理有限公司 | 代理人： | 李彦孚;何承鑫 |
| 地址： | 530000 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开一种猪细环病毒2型环介导等温扩增试剂盒及其应用，该试剂盒包括LAMP引物、2×反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、荧光目视检测试剂、超纯水和猪细环病毒2型DNA模板，所述的LAMP引物包括外引物F3与B3、内引物FIP与BIP和环引物LF与LB。其应用包括使用该试剂盒检测猪细环病毒2型病变组织样品和猪细环病毒2型病原定性研究。特异性检测和敏感性检测证实，本发明提供的LAMP检测方法可实时监测反应并且定量检测出猪细环病毒2型的拷贝数，快速准确的获得检测结果，为简便、快速和可靠的检测猪细环病毒2型带来便利。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 病毒 型环介导 等温 扩增 试剂盒 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种猪细环病毒2型环介导等温扩增试剂盒，其特征在于，包括LAMP引物，其引物包括外引物F3（SEQ ID NO：1）与B3（SEQ ID NO：2）、内引物FIP（SEQ ID NO：3）与BIP（SEQ IDNO：4）和环引物LF（SEQ ID NO：5）与LB（SEQ ID NO：6）；/n其中引物的序列分别为：/nF3 AAGTGCGCAGACGAATGG/nB3 GGGTTTTTACAGCCGCAGAA/nFIP ACTCCGCTCTCAGGAGCTCCTTTATGCCGCTGGTGGTAG/nBIP GCGGTAATCCAGCGGAACCG TAATCCGTGCGCGCAGTA/nLF ACACTCAGCTCTGTTCGTGT/nLB CCCCCCCTCCATGGAAGAA；/n所述的试剂盒还包括2×反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、荧光目视检测试剂、超纯水和猪细环病毒2型DNA模板；所述的2×反应缓冲液包括Tris-HCL、KCL、MgSO4、(NH4)2SO4、Tween20、Betaine和dNTPs；/n所述的荧光目视检测试剂采用钙黄绿素荧光试剂，荧光试剂在反应前加入；/n所述的2×反应缓冲液包括Tris-HCL 35-55mM、KCL 10-30mM、MgSO4 15-28mM、(NH4)2SO4 18-28mM、Tween20 0.5-1.5℅、Betaine 1.3-3.5M 和dNTPs 2.4-4.8mM。/n
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