[发明专利]利用虎杖叶片培养制备含有白藜芦醇根系的方法

摘要

本发明是提供一种利用虎杖叶片培养制备含有白藜芦醇根系的方法；其是利用虎杖叶片及其愈伤组织直接获取不定根和毛状根，再以此不定根和毛状根为原料从中提取白藜芦醇，其包括以下步骤：（1）制备无菌虎杖苗：(2)制虎杖不同外植体愈伤组织：（3）虎杖愈伤组织直接分化生根：即得虎杖根系，进而提供一种替代野生虎杖资源的新途径。

主权项

1.一种利用虎杖叶片培养制备含有白藜芦醇根系的方法，是利用虎杖叶片和/或虎杖愈伤组织直接培养生长出根系，其包括以下步骤：（1）制备无菌虎杖苗：将野生虎杖切成带节幼嫩茎段，消毒、经快繁及壮苗培养，得无菌虎杖苗；(2)制虎杖不同外植体愈伤组织：将上步的无菌虎杖苗的叶片切碎，置于虎杖愈伤组织诱导培养基中培养，控制培养温度为22-28℃，培养时间20-28天，形成虎杖不同外植体愈伤组织；（3）虎杖愈伤组织直接分化生根：将虎杖不同外植体愈伤组织在和（2）步相同的培养基或分化培养基，及和（2）步其余相同的培养条件下继续培养10-55天，即得虎杖根系；（1）中所述快繁培养的培养基的各组分组成为MS， 6-BA 1.0-3.0mg/L ，IBA 0.1-0.3mg/L ， 蔗糖20-40g/L ， 琼脂5-9g/L；所述壮苗培养的培养基各组分组成为1/2MS，IBA 0.2-0.8mg/L ， 蔗糖 20-40g/L ， 琼脂5-9g/L，pH值均为5.5-6.1；步骤（2）中所述的虎杖不同外植体是控制叶片为直径0.3-0.8cm的小圆盘；所述虎杖愈伤组织诱导培养基和分化培养基的各组分组成为MS ， NAA 1.0-4.0mg/L， KT 0.1-0.5 mg/L ， 蔗糖25-35g/L ， 琼脂5.5-7.5g/，控制pH值均为5.5-6.0；所述培养采用黑暗条件下培养；所述根系为不定根和/或毛状根。