[发明专利]一种提高基因置换效率的方法有效
| 申请号： | 201610248628.2 | 申请日： | 2016-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN105861485B | 公开（公告）日： | 2021-08-17 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 上海伊丽萨生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N15/63 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200126 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物医学领域，涉及一种利用Cas9核酸酶的aptamer提高基因置换效率的方法，包括以下步骤：(1)双功能DNA单链的合成：合成具有Cas9特异结合能力的aptamer和DNA供体的序列；所述aptamer序列为：5′‑AGTCCATGGTAAACCCACCTTGGGGT‑GACT‑3′；(2)质粒的制备：构建Cas9‑gRNA质粒，使其能表达Cas9蛋白和转录靶位点附近的gRNA；(3)把所得双功能DNA单链与质粒共转染到要进行基因置换的细胞或组织。本发明采用高亲和度的特异DNA aptamer，不干扰Cas9‑gRNA复合物的形成与稳定，使同源性重组和基因修复的比例达到最高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 基因 置换 效率 方法 | ||
【主权项】：
一种提高基因置换效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)双功能DNA单链的合成：合成包含Cas9特异结合能力的aptamer和DNA供体的单链序列；(2)质粒的制备：构建Cas9‑gRNA质粒，使其能表达Cas9蛋白和转录靶位点附近的gRNA；(3)把所得双功能DNA单链与质粒共转染到要进行基因置换的细胞或组织。
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