[发明专利]一种提高出芽短梗霉全细胞转化合成普鲁兰产量的方法

摘要

本发明属于微生物转化领域，尤其涉及一种提高出芽短梗霉全细胞转化合成普鲁兰产量的方法，通过向二级种子培养基或(和)转化液中添加硫酸铜，提升了出芽短梗霉细胞合成普鲁兰的效率，提高了普鲁兰的产量，增强了普鲁兰的市场竞争力，该结果为提高普鲁兰多糖产量增添了新的方法，也为类似多糖的高产提供了新的思路。

主权项

一种提高出芽短梗霉全细胞转化合成普鲁兰产量的方法，其特征在于：包括以下步骤：准备培养基：斜面培养基：质量体积百分比为20％的土豆汁，葡萄糖20g/L，自然pH；一级种子培养基：葡萄糖20g/L，酵母粉2.5g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.6g/L，NaCl1g/L，K₂HPO₄ 5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2g/L，pH 6.5；二级种子培养基：葡萄糖70g/L，酵母粉5g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.4g/L，NaCl 1g/L，K₂HPO₄ 5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.4g/L，pH 6.5；转化液：葡萄糖50g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2g/L，自然pH。种子培养：一级种子培养：将保存在‑70℃的出芽短梗霉菌种接入50mL一级种子培养基中进行振荡培养，培养温度30℃，摇床转速200rpm，培养时间24小时；二级种子培养：按体积百分含量10％的接种量将一级种子接入二级种子培养基，相同条件下培养36小时；摇瓶转化：收集二级种子培养液并离心，无菌操作将离心后的细胞重新悬浮于50mL转化液中，在摇床中进行全细胞转化反应，反应温度30℃，摇床转速200rpm，转化时间48小时；其中，摇瓶转化体系中的细胞量为：12.61～15.14g/L，二级种子培养基和/或转化液中添加有硫酸铜溶液，二级种子培养基中硫酸铜的浓度为0～0.4mg/L，转化液中硫酸铜的浓度为0～0.6mg/L。