[发明专利]一种新城疫病毒压电免疫传感检测方法有效
申请号: | 201610216481.9 | 申请日: | 2016-04-08 |
公开(公告)号: | CN105784846B | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
发明(设计)人: | 吴胜昔;王玲玲;蔡家利;罗彬彬;张中豪;胡梦云;蒋棚俊 | 申请(专利权)人: | 重庆理工大学 |
主分类号: | G01N29/12 | 分类号: | G01N29/12 |
代理公司: | 重庆博凯知识产权代理有限公司 50212 | 代理人: | 李海华 |
地址: | 400054 重*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | 本发明公开了一种新城疫病毒压电免疫传感检测方法,1)先在石英晶体表面包被葡萄球菌A蛋白;2)再将制备的新城疫病毒单克隆抗体与葡萄球菌A蛋白结合,得到新城疫病毒压电免疫传感器;3)然后将新城疫病毒压电免疫传感器插入被检样品中,通过检测仪检测石英晶体是否出现谐振频率变化,如出现谐振频率变化,则说明被检样品中有新城疫病毒,否则被检样品中没有新城疫病毒。本发明可实时在线检测NDV,具有较高的敏感性和特异性,线性检测范围在2.56ng/ml‑150ng/ml,40min内出现结果。本发明具有较高的敏感性、准确性,快速且低成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 新城 疫病 压电 免疫 传感 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种新城疫病毒压电免疫传感检测方法,其特征在于:步骤如下,1)先在石英晶体表面包被葡萄球菌A蛋白;2)再将制备的新城疫病毒单克隆抗体与葡萄球菌A蛋白结合,得到新城疫病毒压电免疫传感器;3)然后将新城疫病毒压电免疫传感器插入被检样品中,通过检测仪检测石英晶体是否出现谐振频率变化,如出现谐振频率变化,则说明被检样品中有新城疫病毒,否则被检样品中没有新城疫病毒;所述葡萄球菌A蛋白按如下方法提取,复苏并培养金黄色葡萄球菌1.800菌株,收集菌液,采用溶解酶处理并离心,上清用饱和硫酸铵沉淀,PBS溶解后转入透析袋透析;透析物用小鼠I g G‑sephrose 4FF 亲和层析柱纯化;吸附在柱上的SPA用0.1M,pH2.7 盐酸甘氨酸缓冲液洗脱;收集样品,合并透析,浓缩后备用。
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