[发明专利]一种提取拟南芥种子中总RNA的方法在审
| 申请号： | 201610201835.2 | 申请日： | 2016-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN105671032A | 公开（公告）日： | 2016-06-15 |
| 发明（设计）人： | 甘银波;吴敏洁;颜安;盛喆承;于涛 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提取拟南芥种子中总RNA的方法，包括：(1)在液氮冷却条件下研磨拟南芥种子，得拟南芥种子冻干粉；(2)加入到预热的提取缓冲液中，再加入β-巯基乙醇，涡旋混合，离心，吸取上清液；(3)加入氯仿和水饱和酚，涡旋混匀，18～25℃条件下离心，吸取上清液；(4)加入氯化锂，静置，离心，得第一离心沉淀；(5)用DEPC水溶解第一离心沉淀，加乙酸钠和异丙醇，静置，离心，得第二离心沉淀；(6)将第二离心沉淀经醇洗，干燥，复溶即得所述拟南芥种子总RNA。本发明方法操作时间短，重复性好，提取的拟南芥种子的RNA纯度好、质量高，为其他高油、高脂、以及多糖多酚植物组织的提取提供技术参考。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 拟南芥 种子 rna 方法 | ||
【主权项】：
一种提取拟南芥种子中总RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在液氮冷却条件下研磨拟南芥种子，得拟南芥种子冻干粉；(2)将拟南芥种子冻干粉加入到预热的提取缓冲液中，再加入β‑巯基乙醇，涡旋混合，离心，吸取上清液，得第一离心上清液；(3)第一离心上清液中加入氯仿和水饱和酚，涡旋混匀，18～25℃条件下离心，吸取上清液，得第二离心上清液；(4)第二离心上清液中加入氯化锂，静置，离心，得第一离心沉淀；(5)用DEPC水溶解第一离心沉淀，加乙酸钠和异丙醇，静置，离心，得第二离心沉淀；(6)将第二离心沉淀经醇洗，干燥，复溶即得所述拟南芥种子总RNA。
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