[发明专利]一种诱导外源基因在革兰氏阴性菌中表达的系统及其应用有效
申请号: | 201610171174.3 | 申请日: | 2016-03-23 |
公开(公告)号: | CN105779488B | 公开(公告)日: | 2018-06-22 |
发明(设计)人: | 陈国强;赵晗;张浩千;兰陆红 | 申请(专利权)人: | 清华大学;蓝晶(北京)生物科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/01;C12R1/38 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;白艳 |
地址: | 100084 北京市海淀区北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种诱导外源基因在革兰氏阴性菌中表达的系统及其应用。本发明提供了一种在革兰氏阴性菌中表达外源基因的方法,为为用含有阻遏蛋白表达盒和RNA聚合酶表达盒的调控元件调控外源基因表达盒在革兰氏阴性菌中表达;本发明的实验证明,本发明提供革兰氏阴性菌中高效诱导表达系统由特定聚合酶和其对应的启动子两部分构成,在革兰氏阴性菌中诱导表达聚合酶、启动子和驱动的外源基因,可实现外源基因的高效大量表达,实现工业生产中具备简化提取步骤、提高蛋白表达量、降低生产成本的重要意义,具有广泛的应用前景,具有广阔的商业利用价值。 | ||
搜索关键词: | 革兰氏阴性菌 诱导外源基因 外源基因 表达盒 聚合酶 启动子 外源基因表达盒 表达外源基因 应用 蛋白表达量 表达系统 调控元件 高效诱导 商业利用 诱导表达 重要意义 阻遏蛋白 驱动 调控 | ||
【主权项】:
1.一种在革兰氏阴性菌中表达外源基因的方法,为用含有阻遏蛋白表达盒和RNA聚合酶表达盒的调控元件调控外源基因表达盒在革兰氏阴性菌中表达;所述RNA聚合酶表达盒中的RNA聚合酶与所述外源基因表达盒中的驱动外源基因表达的启动子相匹配;所述RNA聚合酶为K1F、VP4或MmP1;所述K1F相匹配的驱动外源基因表达的启动子为K1F‑P;所述VP4相匹配的驱动外源基因表达的启动子为VP4‑P;所述MmP1相匹配的驱动外源基因表达的启动子为MmP1‑P;所述K1F为序列表中序列8所示的蛋白质;所述VP4为序列表中序列9所示的蛋白质;所述MmP1为序列表中序列10所示的蛋白质;所述启动子K1F‑P为编码区为序列表中序列4所示的DNA分子;所述启动子VP4‑P为编码区为序列表中序列5所示的DNA分子;所述启动子MmP1‑P为编码区为序列表中序列6所示的DNA分子。
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