[发明专利]多肉植物巨大赤线HO1的组织培养法

摘要

本发明公开了一种多肉植物巨大赤线HO1的组织培养法，包括以下步骤取生长健壮且无病虫害的巨大赤线HO1花梗进行清洗、消毒，切段后横放接种到愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织的诱导；待无菌愈伤组织成簇状生长时，将小块愈伤组织接种到诱导不定芽培养基上进行不定芽诱导；待上述愈伤组织诱导的无菌苗长至直径0.6～1.5cm时，割取叶片接种到增殖培养基中进行叶片诱导不定芽培养；叶片诱导出的不定芽依次进行生根培养、壮苗培养、移栽。采用该方法能获得大量的巨大赤线HO1组培种苗。

主权项

多肉植物巨大赤线HO1的组织培养法，其特征在于包括以下步骤：1)、取生长健壮且无病虫害的巨大赤线HO1花梗，流水冲洗；2)、愈伤组织的诱导：将上述流水冲洗后的花梗经消毒后，切割成长度为3～5mm，横放接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养；培养条件为：16小时光照，光照强度30～40μmol m‑2·s‑1，温度为25±1℃；8小时暗培养，温度为21±1℃；上述光照和暗培养交替进行；所述愈伤组织诱导培养基：MS+6‑BA1～2mg/L+KT0.5～1mg/L+NAA0.1～0.2mg/L+白砂糖20～30g/L+琼脂7～9g/L，pH为5.5～6.0；3)、不定芽诱导：待无菌愈伤组织成簇状生长时，分割成0.5～1cm的小块；将小块愈伤组织接种到诱导不定芽培养基上进行培养；培养条件为：16小时光照，光照强度30～40μmol m‑2·s‑1，温度为25±1℃；8小时暗培养，温度为21±1℃；上述光照和暗培养交替进行；所述不定芽诱导培养基：MS+NAA1mg/L+KT1mg/L+白砂糖20～30g/L+琼脂7～9g/L，pH为5.5～6.0；4)、叶片诱导不定芽培养：待上述愈伤组织诱导的无菌苗长至直径0.6～1.5cm时，割取单株小苗Ⅰ的叶片；将此叶片沿着叶脉竖切成2半之后接种到增殖培养基中，从而使叶片顶端接触增殖培养基；培养条件为：16小时光照，光照强度40～50μmol m‑2·s‑1，温度为22～26℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行；所述增殖培养基：MS+6‑BA0.1～0.15mg/L+NAA0.05mg/L+1g/L活性炭+白砂糖20～30g/L+琼脂7～9g/L，pH为5.5～6.0；5)、生根培养：待上述叶片诱导出的不定芽长到直径2～5mm，割取后作为小苗Ⅱ接种到生根培养基上进行生根培养；培养条件为：16小时光照，光照强度40～50μmol m‑2·s‑1，温度为22～26℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行；所述生根培养基为：1/2MS基本培养基+1g/L活性炭+白砂糖15～30g/L+琼脂7～9g/L，pH为5.5～5.8；6)、壮苗培养：待上述小苗Ⅱ生根后，接种到壮苗培养基上进行壮苗培养，培养条件为：16小时光照，光照强度40～50μmol m‑2·s‑1，温度为22～26℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行；所述壮苗培养基：1/2MS基本培养基+0.1mg/LNAA+1g/L活性炭+白砂糖15～30g/L+琼脂7～9g/L，pH为5.5～5.8；7)、移栽：待壮苗培养所得的小苗Ⅲ长至直径≥1.5cm、且长出长度大于2cm的根至少3条时，可出瓶种植。