[发明专利]一种新型隐球菌荚膜多糖GXM的制备方法在审
| 申请号： | 201610112390.0 | 申请日： | 2016-02-29 |
| 公开（公告）号： | CN105784987A | 公开（公告）日： | 2016-07-20 |
| 发明（设计）人： | 彭洁;史东东;李宁;粟艳;周泽奇 | 申请（专利权）人： | 丹娜（天津）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/531 | 分类号： | G01N33/531;G01N30/02;G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京布瑞知识产权代理有限公司 11505 | 代理人： | 张丹 |
| 地址： | 300467 天津市滨海新区生态城中天大道2*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种新型隐球菌荚膜多糖GXM的制备方法，利用免疫亲和层析技术制备新型隐球菌荚膜多糖GXM，首先用醋酸钙和冰醋酸处理含荚膜多糖的分泌上清液后，用乙醇沉淀得到粗制荚膜多糖；然后用交联了荚膜多糖GXM单克隆抗体的免疫亲和层析柱对荚膜多糖GXM粗提物进行处理，得到纯化的荚膜多糖GXM。本方法简便、高效、成本低，并能够有效的避免使用有毒有害的化学试剂。此外，本发明还涉及一种新型隐球菌荚膜多糖GXM免疫亲和层析柱，用于纯化粗制荚膜多糖GXM，该免疫亲和层析柱可重复利用，有利于降低制备成本，提高制备效率，其制备方法简单易行。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 球菌 荚膜 多糖 gxm 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种新型隐球菌荚膜多糖GXM免疫亲和层析柱的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将新型隐球菌荚膜多糖GXM单克隆抗体溶于溶液中，并与亲和层析基质混合成匀浆；(2)用交联缓冲液洗涤步骤(1)得到的匀浆，并离心，得到抗体与亲和层析基质的混合物；(3)用交联缓冲液重悬步骤(2)得到的抗体与亲和层析基质的混合物，向得到的混悬液中加入双功能结合剂，室温孵育20‑40分钟，并混匀，液固分离，得到亲和层析基质‑抗体交联复合物；(4)用封闭溶液洗涤步骤(3)得到的亲和层析基质‑抗体交联复合物；(5)将步骤(4)得到的亲和层析基质‑抗体交联复合物重悬于封闭溶液中，室温孵育1.5‑2.5小时，混匀；(6)装柱：将步骤(5)得到的亲和层析基质‑抗体交联复合物填充入层析柱中，制得新型隐球菌荚膜多糖GXM免疫亲和层析柱。
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