[发明专利]一种大苞水竹叶的组织培养快速繁殖方法

摘要

一种大苞水竹叶组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤取大苞水竹叶顶芽作为外植体进行消毒；将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到丛生芽；将所述丛生芽置于MS壮苗培养基中进行壮苗培养得到健壮植株；将所述健壮植株置于MS生根培养基中培养得到完整的带根苗。采用本发明所述方法得到的种苗健壮、成活率高，可在短期内提供大量大苞水竹叶的优质种苗，有效解决了大苞水竹叶的规模化育苗问题。

主权项

一种大苞水竹叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：（1）外植体的选择与消毒：取大苞水竹叶顶芽作为外植体，依次用2%洗洁精水溶液浸泡5~10min、线状自来水冲洗5~15min、75% 乙醇中表面消毒30~ 45s、添加了2‑3滴吐温‑20的0.1% HgCl2消毒8~10min、无菌水冲洗3~5次，最后用消毒滤纸吸去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；（2）顶芽分化获得丛生芽快速繁殖培养：将步骤（1）得到的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23~26℃，光照强度1400~2000lux，光照时间为10~12小时/天的条件下培养30天，顶芽分化后获得丛生芽；其中MS培养基中含0.1~0.4mg/L的KT、1.0~2.0mg/L的6‑BA、1.0~2.0mg/L的NAA、20~30g/L蔗糖和3.8~4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；（3）丛生芽壮苗培养：将步骤（2）中得到的试管苗丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23~26℃，光照强度1400~2000lux，光照时间为10~12小时/天的条件下培养40天得到健壮植株；其中MS壮苗培养基中含0.5~1.5mg/L的6‑BA、0.2~0.6mg/L的IAA、20~30g/L蔗糖和3.8~4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；（4）健壮植株生根培养：将步骤（3）中得到的健壮植株置于MS生根培养基中，在培养温度23~26℃，光照强度1400~2000lux，光照时间为10~12小时/天的条件下培养40天得到带根的完整植株；其中MS生根培养基中含0.5~1.5mg/L的IAA、1.0~2.0 mg/L的IBA、25~30g/L蔗糖和3.8~4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。