[发明专利]人诱导性多能干细胞诱导为间充质干细胞的方法有效
申请号: | 201610107276.9 | 申请日: | 2016-02-25 |
公开(公告)号: | CN105754936B | 公开(公告)日: | 2018-06-08 |
发明(设计)人: | 付清玲;高文翔;孙悦奇 | 申请(专利权)人: | 付清玲 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12N5/071 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫;宋静娜 |
地址: | 510080 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了人诱导性多能干细胞诱导为间充质干细胞的方法、通过所述方法产生的间充质干细胞以及包含间充质干细胞的细胞治疗产品。本发明的方法操作简单、便捷,只需要使用更换诱导培养基和维持培养基即可,不需要使用流式分选技术,节省费用和时间;获得的间充质干细胞纯度高、生存能力强、不容易老化,可至少传代到80代,并保持功能正常。 | ||
搜索关键词: | 间充质干细胞 诱导性多能干细胞 诱导 传代 细胞治疗产品 诱导培养基 分选技术 生存能力 培养基 流式 老化 | ||
【主权项】:
一种人诱导性多能干细胞诱导为间充质干细胞的方法,其特征在于:包括以下步骤:1)将人诱导性多能干细胞置于Matrigel铺板的载体上,使用iPSc‑MSC诱导培养基诱导所述人诱导性多能干细胞以将其转化为间充质干细胞,所述iPSc‑MSC诱导培养基为添加有8‑18%的血清及50‑100μmol/L的L‑抗坏血酸的α‑MEM;2)以增殖性的方式培养步骤1)中得到的间充质干细胞;所述步骤2)通过以下步骤实施:21)消化步骤1)得到的间充质干细胞,将其传代至明胶铺板的载体上,使用维持培养基来培养间充质干细胞,得到第一代间充质干细胞;所述维持培养基为添加有8‑15%的血清、5‑10ng/mL的bFGF以及10‑20ng/mL的内皮生长因子的DMEM高糖培养基;22)将步骤21)得到第一代间充质干细胞再次传代至明胶铺板的载体上,使用所述维持培养基培养,得到第二代间充质干细胞;23)待第二代间充质干细胞长满后,使用所述维持培养基按正常的间充质干细胞培养方法进行培养及传代。
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