[发明专利]基于内含肽的药用重组蛋白的合成方法在审
申请号: | 201610099711.8 | 申请日: | 2016-02-23 |
公开(公告)号: | CN105925596A | 公开(公告)日: | 2016-09-07 |
发明(设计)人: | 陈俊生;朱建伟;韩雷;丁凯;谢跃庆;江华;路慧丽;张宝红;张蕾 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学;美国杰科实验室有限公司;杰科(天津)生物医药有限公司 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C12N15/63;C07K19/00 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中;陈少凌 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种生物技术领域的基于内含肽的药用重组蛋白的合成方法,包括如下步骤:构建表达免疫毒素中具有导向功能的多肽和具有毒性功能的多肽的载体DNA片段,将所述两种多肽的载体DNA片段与内含肽的N端或C端分别连接,形成融合表达载体;取步骤一所述的融合表达载体,表达,得到融合内含肽N端的融合多肽A以及融合内含肽C端的融合多肽B;取融合多肽A和融合多肽B,混合,在内含肽对应的反式剪接条件下,诱导,得到免疫毒素。本发明的方法只需要制备不同的导向部分多肽以及毒性部分多肽,就可以将其进行组合,进而产生可以针对不同靶点及拥有不同毒性机制的免疫毒素,具有显著的多样性及灵活性。 | ||
搜索关键词: | 基于 内含 药用 重组 蛋白 合成 方法 | ||
【主权项】:
一种基于内含肽的药用重组蛋白的合成方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:步骤一,构建表达免疫毒素中具有导向功能的多肽和具有毒性功能的多肽的载体DNA片段,将所述两种多肽的载体DNA片段与内含肽的N端或C端分别连接,形成融合表达载体;其中,所述含有内含肽N端的融合表达载体与含有内含肽C端的融合表达载体所表达的多肽需成对存在,以使得反式剪接反应能够发生;步骤二,取步骤一所述的融合表达载体,分别在合适的宿主细胞中进行表达,得到融合内含肽N端的融合多肽A以及融合内含肽C端的融合多肽B;步骤三,取融合多肽A和融合多肽B,混合,在内含肽对应的反式剪接条件下,诱导免疫毒素的导向功能的多肽以及具有毒性功能的多肽部分进行反式剪接,得到免疫毒素。
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