[发明专利]一种用MspI检测人胃癌易感基因IL-1RN多态性rs9005的方法在审

专利信息
申请号: 201610095044.6 申请日: 2016-02-22
公开(公告)号: CN105567847A 公开(公告)日: 2016-05-11
发明(设计)人: 王凯娟;宋春花;侯瑞生;薛云红;高三友;杨文杰;陈晓霖;徐娅娟;范琦琪 申请(专利权)人: 郑州大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人: 汤东凤
地址: 450000 河南省郑*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明公开了一种用MspI检测人胃癌易感基因IL-1RN多态性rs9005的方法,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法,是采用聚合酶链式反应扩增目的DNA片段,然后将待检测的DNA片段用限制性内切酶酶切,限制性内切酶识别并切割特异的序列,然后将酶切后的产物进行电泳,再由限制酶图谱分析此段序列的特异切位点,藉由片段的多样性来比对不同来源基因序列的差异性。简而言之,就是先PCR扩增相应目的片断,而后进行限制性内切酶切反应,电泳后观察比较限制性图谱来分析序列之间的差异。该方法重复性好,操作较简单,成本低,酶切结果容易辨识。
搜索关键词: 一种 mspi 检测 胃癌 基因 il rn 多态性 rs9005 方法
【主权项】:
一种用MspI检测人胃癌易感基因IL‑1RN多态性rs9005的方法,其特征在于,包括以下步骤:(a)抽提样品的基因组DNA;(b)提供扩增人IL‑1RN基因多态性rs9005位点附近序列的正向引物和反向引物,rs9005上游引物:5’‑GCACTTGGAGACTTGTATG‑3’,rs9005下游引物:5’‑GTGAGGCTGAAGGAAGAA‑3’,以步骤(a)提取的待测人基因组DNA为模板,进行PCR扩增,获取扩增产物;(c)使用限制性内切酶对(b)中获取的扩增产物进行酶切,获取相应的酶切产物;(d)将酶切产物采用3%的琼脂糖凝胶进行电泳,以判定IL‑1RN基因多态性rs9005的各基因型;其中,经电泳后有一条条带者为AA基因型,两条条带者为GG基因型,三条条带者为GA基因型。
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