[发明专利]以CA19-9 cDNA片段为模板制备RNA探针的方法有效
| 申请号： | 201610083165.9 | 申请日： | 2016-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN105567845B | 公开（公告）日： | 2020-05-01 |
| 发明（设计）人： | 徐学明;鲁隼;冯俊清 | 申请（专利权）人： | 广州复能基因有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6811 | 分类号： | C12Q1/6811;C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 张莹 |
| 地址： | 510663 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种以CA19‑9 cDNA为模板制备RNA探针的方法。该方法包括以下步骤：针对CA19‑9 mRNA序列筛选多个靶序列，对于每个靶序列设计至少一对引物，所述引物的PCR扩增产物为多重DNA片段，所述多重DNA片段能包括所有靶序列；从CA19‑9 cDNA质粒中，采用上述引物，通过PCR扩增得到所述多重DNA片段，纯化后混合，作为模板；加入RNA聚合酶和带有生物素标记的UTP进行反应，将UTP掺入产物，纯化后得到RNA探针。本发明得到的cRNA探针能够全部覆盖所有靶序列，简化了探针制备步骤，大幅度缩短整个实验时间，探针特异性更高，稳定性更强，背景信号更低且灵敏度更高。在此基础上，本发明提供了一种快速检测胰腺癌相关的CA19‑9表达的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | ca19 cdna 片段 模板 制备 rna 探针 方法 | ||
【主权项】：
一种以CA19‑9 cDNA为模板制备RNA探针的方法，其特征在于，包括以下步骤：A.针对CA19‑9 mRNA序列筛选多个靶序列，对于每个靶序列设计至少一对引物，所述引物的PCR扩增产物为多重DNA片段，所述多重DNA片段能包括所有靶序列；B.从CA19‑9 cDNA质粒中，采用步骤A的所述引物，通过PCR扩增得到所述多重DNA片段，纯化后混合，作为模板；C.加入RNA聚合酶和带有生物素标记的UTP进行反应，将UTP掺入产物，纯化后得到RNA探针。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广州复能基因有限公司，未经广州复能基因有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610083165.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：非易失性半导体存储设备
- 下一篇：用于制备甲硫氨酸的方法
