[发明专利]一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法

摘要

本发明涉及一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法，可有效解决高效、快速、重现度高的从毛叶香茶菜中提取冬凌草甲素的问题，其解决的技术方案是，1）上样溶液的制备；2）树脂预处理；3）粗冬凌草甲素的制备；4）冬凌草甲素的纯化；本发明以价格低廉的毛叶香茶菜为原料，采用凝胶树脂柱层析法进行纯化，建立了一种工艺简单，重现性好的高纯度冬凌草甲素的制备方法，方法简单，易操作，生产效率高，重现性好，制得冬凌草甲素质量好，纯度高，是冬凌草甲素制备上的一大创新。

主权项

一种从毛叶香茶菜中制备冬凌草甲素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）上样液的制备：毛叶香茶菜干燥药材1kg粉碎，过40目药典筛，每次加质量浓度为95%的乙醇10L，提取3次，每次1.5h，合并3次提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水分散，减压回收溶剂至无醇味，水分散，在3600 r/min下离心30 min，倾取上清液，不溶物加100ml体积浓度为15%的乙醇溶解，在3600 r/min下离心30 min，合并两次上清液制得上样液；2）树脂预处理：方法是，Sephadex LH‑20树脂用甲醇浸泡24h后，倾去甲醇液，用体积浓度为15%的甲醇浸泡12h，每2h置换一次溶剂，湿法装柱，用体积浓度为15%的甲醇洗脱2个柱体积，得预处理好的Sephadex LH‑20树脂；3）装柱与上样：将步骤2）预处理好的树脂湿法装柱，于内径为5cm的层析柱，使树脂床径高比达1︰15，再将步骤1）中的上样液1000ml自然流速通过树脂柱吸附完全；4）分离纯化：树脂柱先用体积浓度为15%的甲醇洗脱1500ml，再用30%的甲醇洗脱4000ml，收集体积浓度为30%甲醇的洗脱液，减压回收溶剂，得相对密度为1.243的稠浸膏；5）重结晶：将上述稠浸膏用20ml甲醇溶解，在‑20℃‑35℃下静置24‑72h，去除上清液，析出白色粉末状结晶，过滤，得白色结晶状粉末，上清液继续放置24‑72h，析出白色粉末状结晶，过滤，得白色结晶状粉末，合并两次白色结晶状粉末，即得冬凌草甲素0.523g，采用HPLC法面积归一化法计算其纯度大于96.81%。