[发明专利]一种EMSA方法及其探针和该探针的制备方法有效
| 申请号： | 201610059545.9 | 申请日： | 2016-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN105506150B | 公开（公告）日： | 2018-09-25 |
| 发明（设计）人： | 董先辉;王晓香;曾健;张娟;杨嘉杰;周剑 | 申请（专利权）人： | 广州伯信生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6804 | 分类号： | C12Q1/6804;C12Q1/6811;C12N15/11;C12N15/10;G01N33/53;G01N33/561 |
| 代理公司： | 北京市盈科律师事务所 11344 | 代理人： | 马丽丽 |
| 地址： | 510000 广东省广州市广州高新技术产业*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种EMSA方法及其探针和该探针的制备方法。EMSA探针所述包含第一条链，所述第一条链包含转录因子结合序列和位于其5’及3’端的接头序列。所述EMSA探针的制备方法，包含以下步骤：合成模板链和生物素标记且LNA修饰的引物，所述模板链包含转录因子结合序列和位于其5’及3’端的接头序列，所述接头序列为回文序列，所述引物的核苷酸序列与接头序列的核苷酸序列相同；采用该引物以模板链为模板进行PCR扩增合成双链EMSA探针。使用所述的EMSA探针可进行EMSA。本发明由单链探针经PCR制得双链探针，不会出现由于复性不彻底造成的假阴性，还克服了单链自由探针带来的显影误差。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 emsa 方法 及其 探针 制备 | ||
【主权项】：
1.一种EMSA探针的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：合成模板链和生物素标记且LNA修饰的引物，所述模板链包含转录因子结合序列和位于其5’及3’端的接头序列，所述接头序列为回文序列，所述引物的核苷酸序列与接头序列的核苷酸序列相同；采用该引物以模板链为模板进行PCR扩增合成双链EMSA探针。
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