[发明专利]利用高分辨熔解曲线检测菌群的分析方法在审
| 申请号： | 201610047905.3 | 申请日： | 2016-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN105803058A | 公开（公告）日： | 2016-07-27 |
| 发明（设计）人： | 徐锋;杨栋;魏华;武晓丽;蔚晓敏;吴姚平 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用高分辨熔解曲线检测菌群的分析方法，所述方法包括以下步骤：目标菌DNA提取；通过设计引物使目标菌DNA的PCR扩增；对目标菌DNA的PCR产物进行DGGE分析；在PCR产物中加入DNA变性剂，进行HRM分析：DNA变性剂为尿素、甲酰胺和盐酸胍，其中，尿素和甲酰胺均能使Tm值降低，盐酸胍则使Tm值升高，使目标菌的PCR产物Tm值差异变大，峰型得以区分开；将分析结果与变性梯度凝胶电泳分析结果相对比，初步建立高分辨熔解曲线用于菌群种类分析的方法。本发明使用不同的DNA变性剂，使得不同DNA片段的Tm值差异变大，更便于区分，初步建立HRM用于菌群种类分析的新方法。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 分辨 熔解 曲线 检测 分析 方法 | ||
【主权项】：
一种利用高分辨熔解曲线检测菌群的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：1)目标菌DNA提取；2)通过设计引物使目标菌DNA的PCR扩增；3)对目标菌DNA的PCR产物进行变性梯度凝胶电泳分析；4)在PCR产物中加入DNA变性剂，进行高分辨溶解曲线分析：所述DNA变性剂为尿素、甲酰胺和盐酸胍，其中，尿素和甲酰胺均能使Tm值降低，盐酸胍则使Tm值升高，使目标菌的PCR产物Tm值差异变大，峰型得以区分开；5)将步骤4)的分析结果与变性梯度凝胶电泳分析结果相对比，初步建立高分辨熔解曲线用于菌群种类分析的方法。
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