[发明专利]一种亚细胞结构的特征性N-连接糖链及其应用

摘要

本发明公开了一种亚细胞结构的特征性N‑连接糖链及其应用，属于糖生物学技术领域。本发明通过膀胱YTS1细胞为实验材料，使用差速离心的方法获得了四种亚细胞结构(微粒体、线粒体、细胞核和细胞质)的蛋白质组分，通过联合凝集素芯片和质谱(MS)的方法分别鉴定的亚细胞结构蛋白的糖基化修饰类型和结构的变化，显示亚细胞结构差异性糖链的分布。本发明得到了10种人膀胱YTS1细胞的亚细胞结构的特征性N‑连接聚糖；利用特征性N‑连接聚糖，可实现对相应亚细胞结构中其他目标物质的间接检测、定性或者定量检测。

主权项

1.一种利用特征性N‑连接聚糖检测相应亚细胞结构中目标物质的方法，其特征在于，所述目标物质存在于亚细胞结构中，通过特征性N‑连接聚糖的检测实现目标物质的定性检测；或者是所述目标物质存在于亚细胞结构中且其含量与特征性N‑连接聚糖相关，通过定量检测特征性N‑连接聚糖实现目标物质的定量检测；所述特征性N‑连接聚糖为m/z 1403.481(Fuc)1(Man)2+(Man)3(GlcNAc)2、2401.862(Fuc)1(Neu5Ac)1(Gal)1(GlcNAc)4+(Man)3(GlcNAc)2，或者2523.909(Fuc)2(Gal)3(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2时，所对应的亚细胞结构为微小体；所述特征性N‑连接聚糖为m/z 1704.608(Gal)1(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2、2231.793(Gal)3(GlcNAc)4+(Man)3(GlcNAc)2、2256.825(Fuc)1(Gal)1(GalNAc)1(GlcNAc)3+(Man)3(GlcNAc)2、2272.280(Gal)2(GlcNAc)5+(Man)3(GlcNAc)2或者2726.988(Fuc)2(Gal)3(GlcNAc)5+(Man)3(GlcNAc)2时，所对应的亚细胞结构为线粒体；所述特征性N‑连接聚糖为m/z 1995.703(Neu5Ac)1(GalNAc)1(Gal)1(GlcNAc)2+(Man)3(GlcNAc)2或者2740.967(Neu5Ac)1(Gal)4(GlcNAc)4+(Man)3(GlcNAc)2时，所对应的亚细胞结构为细胞核；所述亚细胞来自离体的人膀胱YTS1细胞。