[发明专利]一种提高普鲁兰酶活性的方法

摘要

本申请属于生物发酵工程技术领域，具体涉及一种提高普鲁兰酶活性的方法。该方法为在利用生物发酵工程制备普鲁兰酶时，通过基因工程操作手段在普鲁兰酶基因的5’端增加SD序列，和/或在普鲁兰酶基因的3’端增加3t茎环结构序列，重组构建新的普鲁兰酶基因序列，将该基因序列转化表达；可以提高普鲁兰酶活性，并获得较高表达量。本发明创新性的将两个保守序列单独或共同连接于普鲁兰酶基因时，都能较好地提高普鲁兰酶的活性，表现出了较好地应用效果。本发明不仅对于提高普鲁兰酶产量、改进普鲁兰酶的应用具有较好地应用前景，同时也为其他基因改造工程提供了较好地借鉴意义。

主权项

一种提高普鲁兰酶活性的方法，其特征在于，在利用生物发酵工程制备普鲁兰酶时，通过基因工程操作手段在普鲁兰酶基因的5’端增加SD序列，和/或在普鲁兰酶基因的3’端增加3t茎环结构序列，重组构建新的普鲁兰酶基因序列，将该基因序列转化表达；所述SD序列，包括5个碱基，如SEQ ID.1序列中的第9至13位序列所示，即：GGAGG；所述3t茎环结构序列，包括479个碱基，如SEQ ID.1序列中的第3339至3817位序列所示，即：ATTAACTAGAAAGTAAAGAAGTAGTGACCATCTATGATAGTAAGCAAAGGATAAAAAAATGAGTTCATAAAATGAATAACATAGTGTTCTTCAACTTTCGCTTTTTGAAGGTAGATGAAGAACACTATTTTTATTTTCAAAATGAAGGAAGTTTTAAATATGTAATCATTTAAAGGGAACAATGAAAGTAGGAAATAAGTCATTATCTATAACAAAATAACATTTTTATATAGCCAGAAATGAATTATAATATTAATCTTTTCTAAATTGACGTTTTTCTAAACGTTCTATAGCTTCAAGACGCTTAGAATCATCAATATTTGTATACAGAGCTGTTGTTTCCATCGAGTTATGTCCCATTTGATTCGCTAATAGAACAAGATCTTTATTTTCGTTATAATGATTGGTTGCATAAGTATGGCGTAATTTATGAGGGCTTTTCTTTTCATCAAAAGCCCTCGTGTATTTCTCTGTAAGCT。