[发明专利]一种提高植物辐射诱变育种目标性状定向筛选效率的方法

摘要

本发明公开了一种提高植物辐射诱变育种目标性状定向筛选效率的方法，包括如下步骤，对植物种子进行辐射诱变处理得到M0代种子；M0代种子进行多本粗插种植仅混收主穗种子得到M1代，M1代自交结实获得M2代种子；M2代种子在室内进行发苗培养，待幼苗生长到两叶一心时，分别提取每个单株的基因组DNA。利用辐射诱变能加快生物体基因组变异率的特点，在苗期运用分子生物学技术从辐射诱变群体中定向筛选目标性状突变体，减少了耗费在基因无变异或变异不符合所需目标性状导致突变中的工作量，并提高了对目标性状突变体筛选的准确率。

主权项

1.一种提高植物辐射诱变育种目标性状定向筛选效率的方法，包括如下步骤：1)对植物种子进行辐射诱变处理得到M0代种子；2)M0代种子进行多本粗插种植仅混收主穗种子得到M1代，M1代自交结实获得M2代种子；3)M2代种子在室内进行发苗培养，待幼苗生长到两叶一心时，分别提取每个单株的基因组DNA；4)确定育种目标性状，在Gene bank数据库中查找目标性状基因的cDNA序列，所述cDNA序列为ID：AB690551；5)根据目标性状基因的cDNA序列通过Primer Premier软件进行分子引物的设计形成优化了的分子引物，正向引物为5′‑AGAGAGCAGTGAGAGAGG‑3′，反向引物为5′‑GACGGAGTCCTTCCTGAT‑3′；6)用优化了的分子引物，经PCR过程，对M2代单株的基因组DNA进行扩增；7)扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，与DNAMARK比较，检测扩增产物的分子量大小是否与目标性状基因cDNA序列分子量大小一致；8)切胶回收进行基因组测序，与目标性状基因cDNA序列比对；9)具有与目标性状基因cDNA序列差异的M2代单株，在三叶一心时移栽至镉含量背景值一致的大田，再进一步进行表型鉴定；10)严格自交繁殖后代，在成熟期单株收获籽粒，进行籽粒中镉含量的测定，最终选出遗传稳定，目标性状符合育种要求的单株；所述植物种子为水稻种子；所述水稻种子在辐射诱变处理前进行浸泡处理至露白，浸泡时间为不低于24h；所述目标性状为镉低积累。