[发明专利]一种刀鲚耳石微化学分析前处理的方法

摘要

本发明涉及一种刀鲚耳石微化学分析前处理的方法，它包括以下步骤耳石摘取后清洗晾干、将耳石固定在耳石固定模具的底板上表面、配制试剂、将试剂加入到耳石固定模具中形成圆柱状树脂、打磨圆柱状树脂、将耳石转移至载玻片上、形成耳石切片与清洗后烘干耳石切片步骤；本发明的方法作为刀鲚耳石微化学分析前处理方法，在满足了微化学分析所需样品条件的前提下，与鱼类耳石这种生物组织的本体特征相结合。经过本处理方法处理的刀鲚耳石样品，可以满足电子探针分析、激光烧蚀电感耦合等离子质谱分析、稳定同位素分析等多种分析需求，统一了各种耳石微化学分析所需要的样品前处理方法。

主权项

一种刀鲚耳石微化学分析前的处理方法，其特征是该处理方法包括以下步骤：a、耳石在经过摘取后，首先使用去离子水清洗以除去粘液和包膜，然后用纯酒精进一步清洗耳石表面以除去有机质，最后将耳石移入细胞培养板并在室温条件下晾干；b、取耳石固定模具，该耳石固定模具为内径在25~30毫米、高度在30~40mm的且一端具有底板的圆管状物体，使用AB胶水将已经晾干的耳石固定在耳石固定模具的底板上，使得耳石较为弯曲的一面与耳石固定模具的底板上表面接触，备用；c、将环氧树脂与三乙烯四氨依次加入到器皿中并搅拌均匀配制成试剂，环氧树脂与三乙烯四氨的质量比为6~7:1；d、将试剂加入到耳石固定模具中，每个耳石固定模具对应加入3.5~4克试剂，然后将耳石固定模具放入压力为0.15~0.36 巴的真空镶嵌机内抽气以去除耳石固定模具中试剂内的气泡，最后将耳石固定模具放入35~38℃的烘箱内烘烤，使得耳石固定模具内的试剂凝固，形成圆柱状树脂；e、将圆柱状树脂从耳石固定模具内取出，先使用粗砂纸粗磨具有耳石的圆柱状树脂的一端，再用细砂纸精磨耳石，使得耳石大部分暴露，但耳石核心尚未暴露；f、将AB胶水加热融化呈水样后，取水样AB胶滴在写好样本号的载玻片上，随后将打磨至耳石暴露的圆柱状树脂以耳石暴露的一面向下黏贴在载玻片上，压紧并去除气泡，静置使得AB胶水凝固；g、使用切割机切除载玻片另一端对应的圆柱状树脂，先用70微米砂轮打磨至耳石即将暴露，再用500目砂纸打磨耳石树脂片至耳石刚要暴露，最后换用1200目砂纸进行精磨至正反金相显微镜下都能看清耳石核心，使用抛光机并依次采用抛光液和自来水对耳石的核心面进行连续抛光，先用抛光液进行抛光2~3分钟，随后换用自来水抛光1~2分钟，抛光后耳石切片使用金相显微镜的反射光进行检查，确定表面无明显划痕后，最后使用切割机切去除耳石及样本标签外多余的玻璃和树脂部分，得到耳石切片；h、将耳石切片清洗干净后用35~38℃的烘箱烘干；步骤a具体为：耳石在经过摘取后，使用去离子水清洗3~4分钟以除去粘液和包膜，再用纯酒精进一步清洗表面有机质1~2分钟，并在8~10倍的放大镜下检查是否有残留有机质，随后将耳石移入48孔细胞培养板，并在室温条件下晾干10~15小时；步骤b中，在干净的铝箔纸上取用3~4毫升的AB胶水并搅拌1~2分钟后，在酒精灯上加热10~20秒使AB胶水呈水样后，然后取0.05~0.1毫升的AB胶水滴加在耳石固定模具的底板上表面上，将干燥好的耳石的较为弯曲的一面放置于AB胶水上，下压至与底板接触，并确认其呈水平放置后静置45~60分钟等待AB胶水充分凝固。