[发明专利]一种中华鳖源胶原蛋白的纯化方法在审
| 申请号： | 201510428672.7 | 申请日： | 2015-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN105039480A | 公开（公告）日： | 2015-11-11 |
| 发明（设计）人： | 李彩燕;杨桠楠;钱国英;宋伟 | 申请（专利权）人： | 浙江万里学院 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/30 |
| 代理公司： | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人： | 张一平 |
| 地址： | 315100 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种中华鳖源胶原蛋白的纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：浸泡、去脂肪和酶解，酶解过程中将已去杂的中华鳖裙边置于0.5mol/L乙酸，料液比1:25，加入胃蛋白酶酶解液中进行酶解处理，4℃～10℃下提取24h～48h，得到中华鳖裙边胶原蛋白粗提液；在盐析纯化过程中取粗提液溶解于含有NaCl的Tris-HCl缓冲液中，离心取上清液，加入NaCl至上清液中，盐析，再次离心，分别收集沉淀和上清液；将沉淀溶解于0.5mol/L的乙酸中，透析后，冷冻干燥，即得中华鳖胶原蛋白冻干品。与现有技术相比，本发明的优点在于:本发明利用酶解的提取胶原蛋白并通过盐析纯化的方法进行纯化，不仅无环境污染，提取效率高，而且所得产品具有良好的生物学特性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 中华 胶原 蛋白 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种中华鳖源胶原蛋白的纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)浸泡：取中华鳖裙边匀浆打碎，用碱性浸泡盐液中于4℃～10℃下放置24h～48h，蒸馏水反复洗涤，用纱布充分沥干后备用；(2)去脂肪：将步骤(1)浸泡后的中华鳖裙边进行清洗，加入10％～15％异丙醇溶液于4℃～10℃浸泡24h～48h，以去除脂肪，蒸馏水反复洗涤，用纱布充分沥干后备用；(3)酶解：将已去杂的中华鳖裙边置于0.5mol/L乙酸，料液比1:25，加入胃蛋白酶酶解液中进行酶解处理，4℃～10℃下提取24h～48h，得到中华鳖裙边胶原蛋白粗提液；(4)盐析纯化：取步骤(3)的粗提液溶解于含有NaCl的Tris‑HCl缓冲液中，离心取上清液，加入NaCl至上清液中，盐析，再次离心，分别收集沉淀和上清液；将沉淀溶解于0.5mol/L的乙酸中，透析后，冷冻干燥，即得中华鳖胶原蛋白冻干品。
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