[发明专利]基于LAMP实时荧光法的猪等孢球虫卵囊检测方法及其引物在审
申请号: | 201510344540.6 | 申请日: | 2015-06-19 |
公开(公告)号: | CN104862415A | 公开(公告)日: | 2015-08-26 |
发明(设计)人: | 王寿昆;黄翠琴;温福利;岳良平 | 申请(专利权)人: | 龙岩学院;福建农林大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/90 |
代理公司: | 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 | 代理人: | 戴雨君 |
地址: | 364000 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于LAMP实时荧光法的猪等孢球虫卵囊检测方法及其引物,根据猪等孢球虫18S rRNA设计了特异引物,结合荧光定量PCR仪,建立了猪等孢球虫的LAMP实时荧光检测技术。采用本发明方法,猪等孢球虫重组质粒的检测极限是2.74×102 拷贝/µL,换算成质粒DNA浓度为1fg/µL;提取特定个数卵囊的LAMP检测试验结果显示,LAMP的检测极限为5个卵囊的DNA。本发明LAMP实时荧光检测技术的建立为猪等孢球虫的分子检测提供了一种极具价值的检测方法,弥补了传统显微镜检测法的不足。 | ||
搜索关键词: | 基于 lamp 实时 荧光 虫卵 检测 方法 及其 引物 | ||
【主权项】:
检测猪等孢球虫卵囊的引物,其特征在于:所述引物如下:上游外引物F3:5'‑ATAGGATCAGGACCTCGTG‑3';下游外引物B3:5'‑GGCATTCCTCGTTGAAGAT‑3';上游内引物FIP(F1c‑F2):5'‑CGTGCAGCCCAGAACATCTGTGTCTAACGCAAGGAAGT‑3';下游内引物BIP(B1c‑B2):5'‑ACACTGATGCATCCAACGAGTTTCACGATGCATACTCACAAG‑3';上游环引物LoopF:5'‑TCACAGACCTGTTATTGCCTC‑3';下游环引物LoopB:5'‑TGGCCGATAGGTCTAGGTAAT‑3'。
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