[发明专利]用于荧光显微镜以检测来自多种荧光染料的光发射的系统和方法

摘要

本发明涉及荧光显微镜，更具体地，涉及用于检测从用至少四种预定荧光染料标记的样本发射的荧光的方法，其中，至少四种不同的荧光染料包括形成荧光染料对的第一荧光染料和第二荧光染料，该荧光染料对被选择为形成第一荧光染料的Cy3荧光染料类似物和形成第二荧光染料的594荧光染料类似物，或者荧光染料对被选择为形成第一荧光染料的425荧光染料类似物和形成第二荧光染料的488荧光染料类似物。根据本发明，通过以下来实现对来自至少四种预定荧光染料的荧光的检测：选择针对第二荧光染料的激发波长间隔以使得对第一荧光染料的激发减少；以及选择第一荧光染料的发射波长范围以使得对来自第二荧光染料的光发射的渗漏减少。

主权项

一种方法，用于使用包括光源装置的显微镜系统来检测从用多种预定的荧光染料标记的样本发射的荧光，其中，所述方法包括以下步骤：‑选择至少四种不同的荧光染料，所述至少四种不同的荧光染料被配置成发射在可见光光谱内的光，所述至少四种不同的荧光染料包括形成荧光染料对的第一荧光染料和第二荧光染料；‑选择针对所述至少四种不同的荧光染料的激发波长间隔，其中，选择针对所述第二荧光染料的激发波长间隔以使得所述第一荧光染料的激发减少；‑将所述显微镜系统的滤光器装置配置成选择性地允许在与所述至少四种不同的荧光染料的发射波长间隔匹配的发射波长间隔内的光通过，其中，选择针对所述第一荧光染料的发射波长间隔以减少从所述第二荧光染料渗漏的光发射；‑顺序地发射在所选择的激发波长间隔的至少一部分内的光；以及‑检测从所述样本发射的透过所述滤光器装置的光，其中，所述荧光染料对被选择为形成所述第一荧光染料的Cy3类荧光染料和形成所述第二荧光染料的594类荧光染料，或者所述荧光染料对被选择为形成所述第一荧光染料的425类荧光染料和形成所述第二荧光染料的488类荧光染料。