[发明专利]基于蛋白结合的FV文库及其制备方法有效
| 申请号： | 201480009013.3 | 申请日： | 2014-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN104995341B | 公开（公告）日： | 2018-09-07 |
| 发明（设计）人： | 宋炳斗;尹志善;李颂伊;金惠;崔孝汀;崔钟湁 | 申请（专利权）人： | 埃布特拉斯有限公司 |
| 主分类号： | C40B40/10 | 分类号： | C40B40/10;C40B30/04;C07K16/00 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人： | 陈桉 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 韩国;KR |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于蛋白结合制备Fv文库的方法、用所制备的Fv文库筛选靶标抗体的方法、通过该筛选方法筛选的Fv抗体和通过制备Fv文库的方法所制备的Fv文库。本发明的Fv文库是基于蛋白结合从而允许单个功能检查，并允许不用靶标抗原来筛选所需Fv抗体。与传统基于DNA的文库相比蛋白纯化频率明显地减少从而降低成本和时间。 | ||
| 搜索关键词： | 文库 制备 蛋白结合 抗体 筛选 靶标 蛋白纯化 功能检查 文库筛选 | ||
【主权项】：
1.一种基于蛋白结合来构建包括单个分离的Fv的Fv文库的方法，所述方法包括步骤：(a)制备在细胞中表达的重链可变区(VH)结构域蛋白和在细胞中表达的轻链可变区(VL)结构域蛋白；(b)在所述细胞外，通过混合VH结构域蛋白和VL结构域蛋白，单个拼接步骤(a)制备的VH结构域蛋白和VL结构域蛋白以组装成Fv，其中所述拼接选自：(i)野生型结构域之间拼接；(ii)通过在结构域蛋白中引入的半胱氨酸之间的二硫键拼接；和(iii)通过来自卷曲螺旋结构域之间的融合的卷曲螺旋拼接；以及(c)将在步骤(b)中组装的Fv储存在给予识别号码的单个区室中；其中无需用于与靶标结合的所述Fv的预筛选，分析所述单个区室中的每个Fv的功能。
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