[发明专利]一种检测猪链球菌2型和副猪嗜血杆菌的二重PCR方法在审
| 申请号： | 201410833477.8 | 申请日： | 2014-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN104531871A | 公开（公告）日： | 2015-04-22 |
| 发明（设计）人： | 朱建国;韩少鹏;李成之 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/04;C12R1/465;C12R1/21 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人： | 张宁展 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体为一种检测猪链球菌2型和副猪嗜血杆菌的二重PCR方法。其首先从发表的文献中分别筛选出副猪嗜血杆菌保守性基因片段16SrRNA和猪链球菌2型荚膜多糖基因cps2J，作为PCR检测的两个基因靶点。然后将扩增该2个基因片段的2对引物放在一个PCR反应体系，通过对退火温度、特异性等各项参数调整优化，建立直接从样品中一次检测猪链球菌2型和副猪嗜血杆菌的二重PCR检测方法。该方法体系既可以准确检测病原体，还可以对病原体混合感染情况进行分析，从而掌握其发展趋势，起到一箭双雕的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 链球菌 嗜血 杆菌 二重 pcr 方法 | ||
【主权项】：
一种检测猪链球菌2型和副猪嗜血杆菌的二重PCR方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)以猪链球菌2型荚膜多糖基因cps2J和副猪嗜血杆菌保守性基因片段16SrRNA作为二重PCR检测靶点，合成扩增这些靶点基因的引物；(2)将2对引物置于一个PCR反应体系中，扩增猪链球菌2型和副猪嗜血杆菌的基因片断；(3)通过琼脂糖凝胶电泳检测鉴定PCR扩增产物；其中：扩增猪链球菌2型的上游引物的序列如SEQ ID NO：1所示；下游引物的序列如SEQ ID NO：2所示；扩增副猪嗜血杆菌的上游引物的序列如SEQ ID NO：3所示；下游引物的序列如SEQ ID NO：4所示。
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